首先siRNA由于只 …
阅读更多 »使用血清时要注意哪些参数?
血清可以提供细胞生长所必需的生长因子和营养元素,某些细胞特别是转化后的细胞,对于血清的需要量是很低的,在0.5 %左右。有些细胞被“培养成“只生存在低血清浓度的培养基中。由于细胞生长所需的物质已经被完全定性,所以更多的细胞是被培养在添加有特定物质的基础培养基中。如果细胞能够生存在不添加血清的培养基中则是一种比较幸运的情况。 使用血清的时候有一些参数要注意: …
阅读更多 »Q1: 一个孔中应接 …
阅读更多 »免疫共沉淀:当细胞在 …
阅读更多 »血清可以提供细胞生长所必需的生长因子和营养元素,某些细胞特别是转化后的细胞,对于血清的需要量是很低的,在0.5 %左右。有些细胞被“培养成“只生存在低血清浓度的培养基中。由于细胞生长所需的物质已经被完全定性,所以更多的细胞是被培养在添加有特定物质的基础培养基中。如果细胞能够生存在不添加血清的培养基中则是一种比较幸运的情况。 使用血清的时候有一些参数要注意: …
阅读更多 »大多数实验室购买的培养基是预先处理好的瓶装液体培养基,或者是干粉状的需要水化和过滤除菌的培养基,后者比较便宜,用量大时更有价值。 由于培养基中都有酚红或其他染料pH 指示剂,虽然外观看上去都差不多,但事实上它们并不一样,所以千万不能用错。 添加有酚红pH指示剂的培养基的颜色 pH6.5 以下为拧檬黄 pH6.5 为黄色 pH7.0 为橙色 pH7.4 为红色 …
阅读更多 »大多数实验室使用抗生素,但是如果无菌操作技术掌握得很好,抗生素其实也不是必需的。多数抗生素在37°C 时的半衰期都很短,培养基内实际的抗生素浓度要比你以为的低。 细胞培养所用的抗生素通常以干粉形式保存,使用前用无菌水或其他溶剂将其溶解,得到的抗生素溶液可以不需要再进行过滤除菌。 细胞培养的两种标准抗生素 庆大霉素,储存液浓度5-10 mg/ml, 工作浓度为 …
阅读更多 »持续传代的细胞株有更高的生长速率、克隆效率、成瘤率和更多的染色体组型。 持续传代细胞株经常被改造成所需的独特表型。 细胞株分化度越高,它的生长也就越慢。 常用的细胞株 细胞株 细胞类型和来源 贴壁或悬浮培养 3T3 成纤维细胞(鼠,胚胎) 贴壁培养 BHK21 成纤维细胞(叙利亚仓鼠,肾脏) 悬浮培养 MDCK 上皮细胞(狗,肾脏) 贴壁培养 ES 胚胎干细 …
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