2025年 1 月 18日, 星期六
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有Lenti序列的质粒可以直接转染目标细胞吗

带有Lenti序列的质粒通常不能直接转染目标细胞来实现功能,因为这些质粒设计的初衷是通过病毒介导的基因转导。慢病毒系统需要经过病毒包装步骤后才能有效感染并整合到目标细胞的基因组中。 原因: Lenti质粒本身无法感染细胞:Lenti载体质粒中虽然包含有病毒基因组的部分元件,但缺乏构成病毒颗粒所必需的结构蛋白。要将质粒中的基因传递给目标细胞,必须通过包装细胞来 …

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已经把miRNA转染到了SW480细胞中,用来抑制RUNX1的表达,从而抑制细胞行为。已经通过WB验证了转染三天后RUNX1受到了抑制。现在的问题是应该在转染三天后消化细胞再做划痕实验,还是先种板做划痕再进行转染。

我的建议: 通常来说,如果你想研究miRNA对划痕愈合(细胞迁移)的影响,建议先进行miRNA转染,等待足够的时间让miRNA发挥作用(你提到的是三天),然后再进行划痕实验。这可以确保在进行划痕实验时,RUNX1已经被下调,迁移实验所观察到的结果是由RUNX1抑制所导致的。 但如果你担心转染后细胞的粘附性不好或者转染效率不高,也可以先进行划痕实验,让细胞在板 …

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2024诺贝尔化学奖得主David Baker和他的Rosetta模型

Rosetta模型是一套用于蛋白质结构预测、分子对接和设计的计算工具集,由2024年诺贝尔化学奖得主,华盛顿大学David Baker教授的实验室开发。Rosetta最初被设计用于蛋白质结构预测,但如今已发展成一套多功能的平台,被广泛应用于蛋白质折叠、蛋白质-蛋白质和蛋白质-小分子相互作用、以及新蛋白质设计等领域。 Rosetta模型的核心功能  1.蛋白质 …

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2024诺贝尔化学奖之蛋白质结构预测

蛋白质结构预测(Protein Structure Prediction)是一项利用计算方法预测蛋白质分子的三维结构的技术。由于蛋白质的功能很大程度上依赖于其三维结构,预测其结构对理解生物过程、药物设计等领域具有重要意义。然而,实验确定蛋白质结构(如X射线晶体学、核磁共振等方法)耗时费力,因此计算预测成为重要替代方法。 蛋白质结构预测的主要方法 同源建模(H …

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