2024年 11 月 24日, 星期日
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缺口翻译标记DNA

下面程序描述了使用修饰染料核苷酸,用同步DNA 切割通过缺口翻译制备荧光DNA,缺口翻译是通过摸索修饰dUTP 和dTP 的荧光素或花青的最佳条件完成的(Keller 1993; Yu et al. 1994; Zhu et al. 1994) 。该方法对用四甲基罗丹明、德克萨斯红、香豆素和bodipy 修饰的核苷酸可能也适用,但染料的类型、接头、核苷酸以及 …

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测定蛋白质浓度前需要知道什么?

因为蛋白质是细胞结构与功能的主要分了成分,因此常常需要测定样品中蛋白质的含量,鉴定混合物中的特殊蛋白质,以及分析蛋白质的组成和序列。此外,蛋白质分析对合成用于诱导抗体生成的多肽,设计供克隆用的寡核苷酸探针以及证实序列数据的正确性是十分必要的。 为确保蛋白质通过电泳技术获得最好的分离,首先有必要估计待测样品中蛋白质的浓度。如果不做分析,蛋白质总量不足就可能妨碍 …

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抗体标记的步骤

下列步骤描述了使用Cy3作为代表性标记试剂, 用荧光succinimidy l 活性酶标记羊抗体。其他水溶性荧光标记物的使用与此类似(Mujumdar et al. 1993) 抗体分离与纯化 来源于血清,腹水或培养基的抗体,在标记反应开始以前,需纯化以除去蛋白质和其他含有氨基团的分子。在与标记反应混合以前,抗体不应进行强缓冲处理,不然标记混合物会降低,所有 …

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TUNEL分析

TUNEL方法(末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP-地高辛配基切口标记)源自完整固定的细胞核DNA 裂解部位标记(如Gavrieli et al. 1992)。 该法可用于组织切片、玻片上细胞生长、流式细胞计量术分析,用于组织切片的改进程序由Naik 及其合作者提出(Naik et al. 1996) ,叙述如下 1、组织切片的TUNEL 染色1)取下组织, …

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