2025年 1 月 18日, 星期六
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细胞生长速度非常快,现在在密度20-30%时就开始转染,但是到了60小时后细胞密度已经非常高,几乎没有空隙。如果继续等待,是否会导致细胞状态不佳,从而影响到实验中蛋白的表达效果。

细胞密度确实会影响转染效率和蛋白表达。如果细胞密度过高,可能会导致以下问题: 营养和废物积累:高密度会导致培养基中的营养迅速消耗,废物积累增加,这会影响细胞的健康状态,进而影响蛋白表达。 转染效率降低:高密度时,转染试剂和DNA更难均匀分布,影响转染效率。 蛋白表达影响:过度拥挤的细胞状态可能导致蛋白表达效率下降,甚至可能出现表达异常。 建议: 调整转染密度 …

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可否使用慢病毒滴度测定方法来测定AAV(腺相关病毒)的滴度

一般来说,这种慢病毒滴度测定方法不适用于测定AAV(腺相关病毒)的滴度。原因如下: 病毒特性不同:慢病毒和AAV的结构、感染机制不同。慢病毒是逆转录病毒,而AAV是一种非整合的单链DNA病毒,两者的感染和表达方式差异较大。慢病毒的滴度通常通过转染宿主细胞后观察其表达水平来测定,而AAV通常使用其他方法。 检测方法的差异:AAV的滴度检测通常使用qPCR(定量 …

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请问siRNA转染后48h PCR已经敲低到30%以下,但是60h收蛋白,蛋白显著上调。是什么原因,如何在蛋白水平敲低呢?

对于您的问题,siRNA转染后48小时PCR显示基因表达水平已经显著降低到30%以下,但在60小时检测蛋白时,蛋白水平却出现显著上调,这种情况可能有以下原因和应对方法: 可能的原因: 蛋白降解滞后性:即使mRNA水平在48小时时已经显著下降,但蛋白的降解可能需要更长的时间。蛋白具有相对较长的半衰期,因此在mRNA水平下降之后,蛋白水平的下降会有一定的延迟。 …

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lonza电转仪可以用于藻类吗

Lonza 电转仪(如 Lonza 的 Nucleofector 系列)主要设计用于动物细胞和一些较为脆弱的细胞类型,比如哺乳动物细胞、原代细胞、干细胞等。这类电转仪器的主要特点是通过特定的低压和特定波形脉冲,能在不损伤细胞的情况下实现较高的转染效率。因此,Lonza 电转仪并不是专门为藻类细胞设计的,使用时可能会遇到一些问题和限制。 使用 Lonza 电转 …

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