首先siRNA由于只 …
阅读更多 »为什么RNA疗法的研究很多,药物却很少?
mRNA疫苗的成功上市,让RNA疗法的研究再次成为科研界的焦点。 一直以来,小干扰RNA(siRNA)都是RNA研究的热点,它能够在多个水平实现基因的表达沉默,靶向治疗多种疾病。其实,除了基因沉默,还有可以激活目标基因表达的RNA技术,也就是RNA激活(RNAa),具有这种功能的RNA被称为小激活RNA(saRNA)。对于肿瘤免疫、代谢疾病来说,将saRNA …
阅读更多 »免疫共沉淀:当细胞在 …
阅读更多 »mRNA疫苗的成功上市,让RNA疗法的研究再次成为科研界的焦点。 一直以来,小干扰RNA(siRNA)都是RNA研究的热点,它能够在多个水平实现基因的表达沉默,靶向治疗多种疾病。其实,除了基因沉默,还有可以激活目标基因表达的RNA技术,也就是RNA激活(RNAa),具有这种功能的RNA被称为小激活RNA(saRNA)。对于肿瘤免疫、代谢疾病来说,将saRNA …
阅读更多 »病毒载体最常用的有遍在启动子(ubiquitous promoters) 、细胞类型特异性启动子和多聚腺苷酸化信号。 遍在启动子• 人类CMV 立即早期启动子• 小鼠干细胞病毒(MSCV) 启动子• CMV 增强子与鸡β-actin 启动子融合的CAG 杂合启动子(也称为CGA 、CBA 或CB ;在不同版本中的长度不同)• 人类EF-α• 人类磷酸甘油酸激 …
阅读更多 »1. 制备载体储备液。 2. 以每个靶细胞不同的MOI 或载体剂量转导靶细胞。 腺病毒载体: 100~ 10 000 个病毒颗粒/靶细胞。腺相关病毒载体: 10 000~ 100 000 个病毒基因组/靶细胞。慢病毒载体: MOI5 ~ 500 。 3 在转导后3 ~ 5 天对转入基因的表达进行评价。 对于载体编码蛋白质,有多种方法可用来评价转导细胞中转入基 …
阅读更多 »反转录病毒载体 最常用的反转录病毒载体基于Mo -MLV 。第一代载体所携带的转基因的两侧是2 个完整的LTR, 由增强子(U3) 、R 区(即转录起始区,在病毒颗粒中的载体基因组两端均存在)及U5 区构成。病毒载体的包装主要由包装信号序列(ψ)介导,而邻近的gag序列能够显著提高其包装效率。所有反转录病毒载体均携带一个ψ甲序列和部分gag 序列组成的扩展包 …
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