首先siRNA由于只 …
阅读更多 »体外培养细胞的一般性质(三)
体外培养细胞的能量代谢 体外培养细胞的主要能量来自葡萄糖。大多数培养液含1 g/L (5.55mmol/L)葡萄糖, 近年来含4.5g/L 葡萄糖的高糖培养液(主要是DMEM 和RPMil640 ) 使用得越来越多。这使得细胞增殖更快。葡萄糖主要被细胞用作糖酵解的碳源,以乳酸为终产物。培养细胞中三狻酸循环(也称拧檬酸循环)仍然活跃,氨基酸作为碳源,特别是谷氨 …
阅读更多 »Q1: 一个孔中应接 …
阅读更多 »体外培养细胞的能量代谢 体外培养细胞的主要能量来自葡萄糖。大多数培养液含1 g/L (5.55mmol/L)葡萄糖, 近年来含4.5g/L 葡萄糖的高糖培养液(主要是DMEM 和RPMil640 ) 使用得越来越多。这使得细胞增殖更快。葡萄糖主要被细胞用作糖酵解的碳源,以乳酸为终产物。培养细胞中三狻酸循环(也称拧檬酸循环)仍然活跃,氨基酸作为碳源,特别是谷氨 …
阅读更多 »体外培养细胞的功能表达(分化) 由于体外细胞培养的过程是不断选择具有分裂增殖能力细胞群的过程,所以细胞群一直处于变化中。体外的细胞培养物逐渐会变为处于动态平衡的由多能干细胞、未分化的定向前体细胞和成熟细胞组成的细胞群体,并且,这种平衡可随着环境条件变化而改变。在细胞密度较低的情况下,连续传代可促进细胞增殖、限制细胞分化,而高细胞密度、低血清和合适的激素条件, …
阅读更多 »细胞的存活及生长具有贴壁依赖性 绝大多数实体组织来源的细胞,在离开机体、于体外生存生长时,都具有贴壁依赖性,即以单层形式附着在培养瓶或培养皿表面的方式生长。如果无法贴壁(如接种细胞过多、总被摇动等),则细胞将会死亡。从组织中分离出来的细胞或传代后的细胞,首先黏附于培养界面,在界面上铺展,然后才开始分裂、增殖。 细胞的黏附是通过特异的细胞表面受体与细胞外基质分 …
阅读更多 »(一)无菌操作 细胞在体外生长,其生存环境发生了很大变化。首先,体外培养细胞缺乏抗感染能力,故应无菌操作,以最大限度地防止微生物污染。培养所用的一切物品、液体均应无菌。操作前最好先列出所需用品,培养液等须37°C预热或室温平衡,所有物品准备好后再开始操作, 避免往返拿取用品。 (二)细胞培养操作区域消毒 无菌间或超净台的操作区域使用前后需经紫外灯照射20-3 …
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