首先siRNA由于只 …
阅读更多 »肿瘤细胞的原代培养
由于不同人种、不同民族的遗传基因不同,所以对不同疾病, 特别是对复杂疾病的易感性、对各种药物的耐受性和对各种环境因子的反应也不同,建立国人肿瘤细胞株, 可为国人疾病的诊断、防治及药物开发提供肿瘤模型。 (一)材料与设备 1. 无菌材料眼科剪,眼科镂, 一次性培养皿,细胞培养瓶T25 、T75 , 冻存管,一次性小滤器, 一次性离心15~50ml, 高糖DME …
阅读更多 »细胞培养的质量好坏是 …
阅读更多 »由于不同人种、不同民族的遗传基因不同,所以对不同疾病, 特别是对复杂疾病的易感性、对各种药物的耐受性和对各种环境因子的反应也不同,建立国人肿瘤细胞株, 可为国人疾病的诊断、防治及药物开发提供肿瘤模型。 (一)材料与设备 1. 无菌材料眼科剪,眼科镂, 一次性培养皿,细胞培养瓶T25 、T75 , 冻存管,一次性小滤器, 一次性离心15~50ml, 高糖DME …
阅读更多 »随着细胞培养技术的不断改进,虽然正常细胞难于培养成活,科研人员还是不断研究各种正常细胞的培养方法。到目前为止,几乎体内各种组织细胞均可在体外成功培养。越来越多的研究工作可应用体外培养的正常细胞作为模型开展工作。神经胶质细胞的成功培养最早由Raff 等完成。视神经胶质细胞的培养开始于1990 年,先后有多个实验室培养成功。视神经胶质细胞参与眼部多种疾病的发生、 …
阅读更多 »如何快速实现蝗虫、七鳃鳗、猪等动物的基因敲除呢? 如果实验室研究人体疾病基因,需要稳定表达时,我们可能会选择基因工程小鼠,但如果课题组研究的是其他哺乳动物,比如猪、蝗虫、鱼之类的,基因工程的工作就相对复杂了。首先要设计基因载体,然后打入靶细胞进行同源重组,再培养细胞、筛选……一套工夫下来,要不目的基因没重组,要不模型全死了。要不找公司做?老牌的公司构建基因工 …
阅读更多 »小鼠胚胎成纤维细胞(MEF) 作为原代培养细胞,其刺激增殖的能力强且可靠、易培养、来源丰富,常被用作干细胞培养的饲养层。一方面提供刺激干细胞增殖的各种因子,另一方面保持干细胞的未分化状态。虽然MEF 传代次数有限,但可早期冻存一些,不断复苏,保持长期使用。MEF 的缺点是无法耐受G418 的筛选。替代方法是从持续表达neo 抗性的小鼠品系或转基因品系来分离培 …
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