2024年 11 月 21日, 星期四
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世界上最遥远的距离之荧光定量PCR

世界上最遥远的距离不是天涯海角,而是我天天和你在一起,你却不了解我。 荧光定量PCR常做,相关概念常说,可它们到底啥意思? 荧光定量PCR中基线、阈值、Ct值、扩增曲线、熔解曲线等基本概念 基线(Baseline):是指在PCR扩增反应的最初数个循环里,荧光信号变化不大。接近一条直线,这样的直线即是基线。 荧光域值(threshold)的设定:一般将 PCR …

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免疫共沉淀超详细操作步骤

一、准备工作 预冷PBS,RIPA Buffer,细胞刮子(用保鲜膜包好后,埋冰下),离心机 二、操作步骤 用预冷的PBS洗涤细胞两次,最后一次吸干PBS; 加入预冷的RIPA Buffer(1ml/107个细胞、10cm培养皿或150cm2培养瓶,0.5ml/5×106个细胞、6cm培养皿、75cm2培养瓶) 用预冷的细胞刮子将细胞从培养皿或培养瓶上刮下, …

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Real-time qPCR实验设计—-从开始到结束

实验设计其实比实验本身更重要!!好的实验设计可以事半功倍,节省时间节省时间!!尤其做生物实验,一定要查询尽可能完全的相关资料,整理好思路,设计好实验路线。当然实验过程中出现各种各样的变化,但有足够多的背景知识,就可以分析原因,才有可能创新。 一、 对于一个real-time qPCR而言,首先就是实验材料的处理和料;然后引物设计,这步至关重要,好的引物是实验 …

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siRNA转染与DNA转染有什么不一样?

小干涉RNA(siRNA)是在RNA干涉过程中人工体外合成的小片段RNA,由约20个碱基对组成,包括5个磷酸盐,2个核苷和3个悬臂。SiRNA在RNA沉默通道中起中心作用,是对特定信使RNA(mRNA)进行降解的指导要素。在实验室中通过RNAi这种方式,利用具有同源性的双链RNA(dsRNA)诱导序列特异的目标基因的沉默,迅速阻断基因活性。 什么样的转染试剂 …

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