英格恩生物技术博客 生物实验干货分享

将siRNA转染入贴壁动物细胞（如哺乳动物细胞系、昆虫细胞系）。 以24孔板siRNA转染为例： $1$ 转染前一天，接种适当数量的细胞至细胞培养板中，使转染时的细胞密度能够达到30~50％$\mathrm{不}\mathrm{同}\mathrm{细}\mathrm{胞}\mathrm{生}\mathrm{长}\mathrm{速}\mathrm{度}\mathrm{不}\mathrm{一}\mathrm{样}，\mathrm{因}\mathrm{此}，\mathrm{接}\mathrm{种}\mathrm{细}\mathrm{胞}\mathrm{的}\mathrm{数}\mathrm{量}\mathrm{需}\mathrm{要}\mathrm{根}\mathrm{据}\mathrm{细}\mathrm{胞}\mathrm{培}\mathrm{养}\mathrm{的}\mathrm{经}\mathrm{验}$，请使用无抗生素的培养基。 注意：转染时，细胞密度是影响转染效率的关键因素之一，细胞生长过度会削弱细 …

一、编号 实验动物常需要标记以示区别。编号的方法很多，根据动物的种类数量和观察时间长短等因素来选择合适的标记方法。 $\mathrm{一}$挂牌法：将号码烙压在圆形或方形金属牌上$\mathrm{最}\mathrm{好}\mathrm{用}\mathrm{铝}\mathrm{或}\mathrm{不}\mathrm{锈}\mathrm{钢}\mathrm{的},\mathrm{它}\mathrm{可}\mathrm{长}\mathrm{期}\mathrm{使}\mathrm{用}\mathrm{不}\mathrm{生}\mathrm{锈}$,或将号码按实验分组编号烙在栓动物颈部的皮带上，将此颈圈固定在动物颈部。该法适用于狗等大型动物。 $\mathrm{二}$打号法：用刺数钳$\mathrm{又}\mathrm{称}\mathrm{耳}\mathrm{号}\mathrm{钳}$将号码打在动物耳朵上。打 …

1.装板 将密封用硅胶框放在平玻璃上，然后将凹型玻璃与平玻璃重叠，将两块玻璃立起来使底端接触桌面，用手将两块玻璃夹住放入电泳槽内，然后插入斜插板到适中程度, 即可灌胶。 2. 凝胶的聚合 分离胶和浓缩胶的制备：按下表中溶液的顺序及比例，配置10%的分离胶和4.8%的浓缩胶。 试剂名称 10%的分离胶/mL 4.8%的浓缩胶/mL Acr/Bis 30% 分离 …

一、Real-time qPCR定量方法 可以分为绝对定量和相对定量。 绝对定量是用一系列已知浓度的标准品制作标准曲线，在相同的条件下目的基因测得的荧光信号量同标准曲线进行比较，从而得到目的基因的量。该标准品可以是纯化的质粒DNA，体外转录的RNA，或者是体外合成的ssDNA。 相对定量可以分为比较Ct法和其他一些相对方法。比较Ct指的是通过与内参基因Ct值 …