2024年 11 月 22日, 星期五
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为什么磷酸钙转染并不稳定?为什么磷酸钙转染并不经济?

常规转染技术可分为两大类,一类是瞬时转染,一类是稳定转染(永久转染)。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色体中,因此一个宿主细胞中可存在多个拷贝数,产生高水平的表达,但通常只持续几天,多用于启动子和其它调控元件的分析。后者外源DNA 既可以整合到宿主染色体中,也可能作为一种游离体(episome)存在。 转染技术的选择对转染结果影响也很大。磷酸钙转染技术是 …

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将siRNA转染入贴壁动物细胞的转染方案及相关检测

将siRNA转染入贴壁动物细胞(如哺乳动物细胞系、昆虫细胞系)。 以24孔板siRNA转染为例: (1) 转染前一天,接种适当数量的细胞至细胞培养板中,使转染时的细胞密度能够达到30~50%(不同细胞生长速度不一样,因此,接种细胞的数量需要根据细胞培养的经验),请使用无抗生素的培养基。 注意:转染时,细胞密度是影响转染效率的关键因素之一,细胞生长过度会削弱细 …

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动物实验系列篇章之二——实验动物的编号和分组

一、编号 实验动物常需要标记以示区别。编号的方法很多,根据动物的种类数量和观察时间长短等因素来选择合适的标记方法。 (一)挂牌法:将号码烙压在圆形或方形金属牌上(最好用铝或不锈钢的,它可长期使用不生锈),或将号码按实验分组编号烙在栓动物颈部的皮带上,将此颈圈固定在动物颈部。该法适用于狗等大型动物。 (二)打号法:用刺数钳(又称耳号钳)将号码打在动物耳朵上。打 …

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为什么你总是做不好SDS-PAGE?

1.装板 将密封用硅胶框放在平玻璃上,然后将凹型玻璃与平玻璃重叠,将两块玻璃立起来使底端接触桌面,用手将两块玻璃夹住放入电泳槽内,然后插入斜插板到适中程度, 即可灌胶。 2. 凝胶的聚合 分离胶和浓缩胶的制备:按下表中溶液的顺序及比例,配置10%的分离胶和4.8%的浓缩胶。 试剂名称 10%的分离胶/mL 4.8%的浓缩胶/mL Acr/Bis 30% 分离 …

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