英格恩生物技术博客 生物实验干货分享

悬浮细胞的siRNA转染操作步骤，以24孔板siRNA转染为例 1.提前1天细胞种植 悬浮细胞：采用对数生长期的细胞，数量为常规培养细胞数的1/3进行转染实验。如某细胞常规培养的细胞数是6×105，那么就用2×105的细胞进行转染。 2.转染过程 ⑴取0.67ug(50pmol)的siRNA，加入一定量无血清稀释液，充分混匀，制成RNA稀释液，终体积为25μ …

     脂肪酸氧化（FAO）是细胞获得ATP和NADPH来克服代谢应激的关键。然而，脂肪酸氧化（FAO）在肿瘤中调节的机制仍不清楚。现分享一篇DNA转染（Entranster）与核受体Nur77和脂肪酸氧化及黑色素瘤细胞研究的文献，以供参考。

      免疫细胞谱系规范和功能受祖源和环境因素的影响。免疫细胞，如中性粒细胞、单核细胞和髓系抑制因子细胞在炎症环境中分化的机制尚未完全阐明。现分享一篇RNA转染（Entranster）与mir-136诱导骨髓细胞分化研究的文献，以供参考。

1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致siRNA转染实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在，如皮 …