首先siRNA由于只 …
阅读更多 »值得收藏的western-blot实验注意事项
· 滤纸、胶、膜之间的大小,一般是滤纸>=膜>=胶。 · 滤纸、胶、膜之间千万不能有气泡,气泡会造成短路。 · 因为DEPF膜的疏水性,膜必须首先在甲醇中完全浸湿。而且在以后的操作中,膜也必须随时保持湿润(干膜法除外)。 · 滤纸可以重复利用,上层滤纸(靠膜)内吸附有很多转移透过的蛋白质,所以上下滤纸一定不能弄混,在不能分辨的情况下,可以将靠胶滤 …
阅读更多 »Q1: 一个孔中应接 …
阅读更多 »· 滤纸、胶、膜之间的大小,一般是滤纸>=膜>=胶。 · 滤纸、胶、膜之间千万不能有气泡,气泡会造成短路。 · 因为DEPF膜的疏水性,膜必须首先在甲醇中完全浸湿。而且在以后的操作中,膜也必须随时保持湿润(干膜法除外)。 · 滤纸可以重复利用,上层滤纸(靠膜)内吸附有很多转移透过的蛋白质,所以上下滤纸一定不能弄混,在不能分辨的情况下,可以将靠胶滤 …
阅读更多 »电转染实验效率低,可能是以下几点原因: 1. 不合适的电场强度 合适的电场强度对于电转染实验非常重要,电场强度不能过高,过高会增加细胞的死亡率;也不能过低,过低不能增加膜的通透性或在膜上形成小孔。不同细胞系具有不同的最佳场强值,实验前应测定所转染细胞系的最佳电场强度。 2. 细胞选择错 …
阅读更多 »可能有多种原因: 目标蛋白对细胞有毒性,导致细胞死亡; 转染试剂以及DNA用量信息需要优化,否则对细胞具有伤害; 细胞贴壁转染之后没有正常换液。 建议: 考虑对目标蛋白进行截短构建、尝试其他细胞系统; 摸索转染试剂以及DNA用量信息,如果转染试剂毒性太大,可以考虑尝试Entranster转染试剂。 对转染后的细胞进行换液处理,如果细胞状态感觉不够理想,可以考 …
阅读更多 »肺癌是发病率和死亡率增长最快,对人群健康和生命威胁最大的恶性肿瘤之一。肺肿瘤发生是一个复杂的过程,包括基因突变或表观遗传变化等多种因素,导致细胞失控增殖、恶性转化和肿瘤转移。其他研究表明,慢性炎症与肝脏和肠道的肿瘤发生密切相关,而许多流行病学研究表明,慢性炎症可能在肺肿瘤发生中起关键作用。现分享一篇运用体内 …
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