首先siRNA由于只 …
阅读更多 »提高细胞转染效率的要点
1.组织培养试剂 优化细胞生长条件。只使用新鲜配制的培养基和添加剂,并经可能减少所用试剂的变更。 基础培养基—目前所使用的各种市售培养基(如,RPMI 1640和DMEM)。培养基的成分包括营养物质(氨基酸,葡萄糖),维生素,无机盐,和缓冲物质。有些成分非常不稳定,因此如果不在使用时新鲜加入就可能会产生问题。务必要使培养基避光保存。因为已知有一些组分和缓冲物 …
阅读更多 »1.组织培养试剂 优化细胞生长条件。只使用新鲜配制的培养基和添加剂,并经可能减少所用试剂的变更。 基础培养基—目前所使用的各种市售培养基(如,RPMI 1640和DMEM)。培养基的成分包括营养物质(氨基酸,葡萄糖),维生素,无机盐,和缓冲物质。有些成分非常不稳定,因此如果不在使用时新鲜加入就可能会产生问题。务必要使培养基避光保存。因为已知有一些组分和缓冲物 …
阅读更多 »为保证RNA转染的高效率,在转染过程中应注意: 1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境 …
阅读更多 »细胞坏死是一种缺乏细胞凋亡和自噬特征的细胞死亡。在过去的几年里,人们发现坏死的发生和过程是程序化的,并且受到严格的调节。大量研究表明,死亡配体(如CD95L、TNF和TNF相关的凋亡诱导配体)诱导依赖于含死亡结构域(dd)激酶rip1活性的caspase独立的坏死样细胞的死亡。虽然坏死的诱导机制越来越清楚,但这一过程的执行仍然有些难以捉摸。现分享一篇ECL发 …
阅读更多 »在小鼠中,出生后切牙的持续生长是由位于切牙的近端的牙乳头间充质细胞和牙上皮干细胞协调这两个群体的多能祖细胞所协调的。但两者之间合作的分子机制在很大程度上是未知的。现分享一篇ECL发光液(enlight)与间充质信号转导和牙源性上皮干细胞稳态研究的文献,以供参考。
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