首先siRNA由于只 …
阅读更多 »RNA转染效率影响因素
1.转染试剂 转染中要额外注意的就是转染试剂应该是确认无RNase污染的,而且也尽量避免和质粒DNA转染混用—即使试剂本身兼容DNA和RNA转染,因RNA与DNA大小不同,转染条件不同,所需的试剂也应不同,所以RNA专用的转染试剂会更好一些。比如Entranster-R试剂. 2.RNA转染时RNA的用量 RNA转染的用量必须参考RNA转染试剂说明,因为RN …
阅读更多 »细胞培养的质量好坏是 …
阅读更多 »Q1: 一个孔中应接 …
阅读更多 »1.转染试剂 转染中要额外注意的就是转染试剂应该是确认无RNase污染的,而且也尽量避免和质粒DNA转染混用—即使试剂本身兼容DNA和RNA转染,因RNA与DNA大小不同,转染条件不同,所需的试剂也应不同,所以RNA专用的转染试剂会更好一些。比如Entranster-R试剂. 2.RNA转染时RNA的用量 RNA转染的用量必须参考RNA转染试剂说明,因为RN …
阅读更多 »三氯乙烯(TCE)是一种挥发性有机化学试剂,已广泛应用于工业有机溶剂中,是大气、土壤、地下水和食品中的常见污染物。由于肝脏是主要的TCE靶器官之一,TCE引起的肝损伤在职业工作者中经常被报道,TCE暴露被怀疑与肝癌的风险增加有关。在动物实验中,TCE处理可诱导小鼠肝细胞癌(HCC),但其机制尚不清楚。现分享一篇RNA转染(Entranster)与三氯乙烯和肝 …
阅读更多 »1. 电场强度要合适 合适的电场强度对于电转染实验非常重要,电场强度不能过高,过高会增加细胞的死亡率;也不能过低,过低不能增加膜的通透性或在膜上形成小孔。不同细胞系具有不同的最佳场强值,实验前应测定所转染细胞系的最佳电场强度。 2. 细胞状态要好 用于电转的细胞一般选取处于对数生长期的细胞(15代以内,传代后2 …
阅读更多 »细胞转染效率重复性差原因: 细胞融合度不同。保证同样的接种量及同样的时间。 细菌污染。可使用Entranster试剂,培养基可加抗生素,避免细胞污染。 细胞传代次数太高了。可重新复苏一管新的细胞。 血清质量不稳定。用同一批号的血清。
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