英格恩生物技术博客 生物实验干货分享

1. 首先确定模板RNA完整性好，无DNA污染。 2. RNA模板中不应含有扩增反应抑制剂。 3. 为了防止模板降解，在反应体系中加入RNase抑制剂RNasin。 4. 使用适量的模板RNA，模板量太多会降低特异性，太少会导致扩增不出条带或条带太弱。 5. 若模板中有二级结构，可通过提高逆转录反应温度来提高扩增效果。 6. 设计引物时，避免在引物3’端含有 …

1. RNA与转染试剂比例不佳    由于RNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记，决定了RNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件，建议先进行预实验优化。 2. 细胞密度不佳    调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调，但未成功转染的细胞却不受影响，这 …

钠/氢交换因子1（NHE1）在生理条件下维持中枢神经系统（CNS）的细胞内PH（phi）稳态中起着重要作用，并与脑缺血引起的神经元死亡和细胞内Na离子和Ca离子超载有关。然而，其在蛛网膜下腔出血（SAH）诱发的早期脑损伤（EBI）中的作用和潜在机制尚未得到充分探讨。现分享一篇体内转染（entranster）与蛛网膜下腔出血后早期脑损伤研究的文献，以供参考。 …

     由于环境污染和烟草的持续消费，肺癌已成为男性和女性癌症死亡的最常见原因。肺癌分为两类：小细胞肺癌和非小细胞肺癌。在所有肺癌患者中，非小细胞肺癌占80%-85%。放疗技术已成为70%非小细胞肺癌患者缓解疼痛和梗阻性症状等亚临床疾病的主要治疗方法。与小细胞肺癌相比，非小细胞肺癌对放射治疗的抵抗力更强，逆转这种抵抗力是临床医师目前面临的挑战之一。 现分享 …