英格恩生物技术博客 生物实验干货分享

       嵌合抗原受体修饰的T（CAR-T）细胞对血液恶性肿瘤具有很强的抗肿瘤活性。然而，将这一成功转化为实体瘤仍然令人沮丧。在实体瘤的治疗中，CAR-T治疗面临着免疫抑制环境等巨大困难。在抑制环境的建立中，程序性死亡因子-1（pd-1）/程序性死亡因子配体1（pd-l1）轴被认为起关键作用。现分享一篇慢病毒感染（envirus）与PD-1和嵌合抗原受体 …

siRNA转染后细胞死亡，原因也是多样的，如脂质体毒性，转染浓度过高，转染前的细胞状态不佳等都可能导致转染后细胞死亡的情况发生，这种情况下就需要适当优化转染条件；可以选择细胞毒性小的非脂质体类的转染试剂，如纳米材料的Entranster试剂，另外，如果siRNA所靶向的基因对于维持细胞生长是非常重要的，出现细胞死亡的现象可能正是由于基因干扰引起的，如果由于细 …

1.        样品质量。所抽取样品的蛋白含量，蛋白变性是否充分等等，还有，蛋白样品的PH值是否在7~8之间。这会直接影响到样品浓缩的效果。此外，蛋白样品是否降解、目的蛋白是否已抽取充分都会对最终结果的可靠性有影响。 2.        凝胶质量。不连续SDS-PAGE胶对凝 …

1、巣式pcr（Nest-PCR）可增加稀有靶序列的灵敏度；降低了扩增多个靶位点的可能性；提高PCR特异性 2、递减PCR（Touch Down PCR）：前几个循环使用严谨的退火条件提高特异性；循环设在比估算的Tm高大约5℃的退火温度下开始，然后每个循环降低1-2℃，直到退火温度低于Tm 5℃ 。适合用于AFLP、DNA指纹分析等。 3、热启动PCR：抑制 …