英格恩生物技术博客 生物实验干货分享

1. RNA与转染试剂比例不佳    由于RNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记，决定了RNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件，建议先进行预实验优化。 2. 细胞密度不佳    调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调，但未成功转染的细胞却不受影响，这 …

       siRNA导入细胞有以下几种方法：化学转染技术、电穿孔法、磷酸钙共沉淀技术、显微注射和载体导入技术。选择时应该依据实验条件考虑以下因素：细胞对转入方式的承受能力、细胞对病毒侵染的易感性、细胞的生长特性等。对贴壁细胞来说化学转染技术（Entranster）是最为常用的方法，而对悬浮细胞则采用电穿孔法效果较好 …

       我做了很久的WB，最大的一个难点感觉在于样品制备上！蛋白的降解有些时候是你想象不到的，可能出奇的糟糕，也可能完全没事~~如果单独做WB的话，感觉以“快速彻底裂解，先变性后保存”的原则比较有效，尽量选择足够强的裂解液，甚至直接给loading buffer裂解，然后取出部分蛋白定量，其余加入loading …

      动脉粥样硬化（AS）是一种进行性的血管疾病，其特征是大动脉内膜和管腔内脂质积聚、炎症、动脉粥样硬化性斑块形成和纤维化，是冠心病的主要原因，并导致心肌梗死。有效的抗AS药物目前在临床上还很少见。因此，迫切需要开发新的抗AS药物，以减少AS的并发症。现分享一篇ECL发光液（enlight）与hexarelin来减轻动脉粥样硬化研究的文献，以供参考。 …