英格恩生物技术博客 生物实验干货分享

质粒DNA细胞转染实验效率影响因素有以下几方面： 1，  质粒的大小和质量       线性化还是超螺旋会影响转染结果：超螺旋质粒的转染效率比线性DNA高得多，特别是瞬时转染。而线性化DNA转染的整合几率高。质粒太大了转染会困难一些。毕竟，相对致密、较小的外源异物被细胞内吞的几率要大一些。如果你的质 …

       荧光淬灭是Western Blot发光时常见的现象，即加ECL发光液后立刻可以看到很明显的亮光，但亮光很快就消逝了，压完片后条带却很弱，甚至没有条带，发生这种情况的原因可能有以下几个方面: 1. 抗体浓度太高，局部过多的HRP会快速消耗底物，导致荧光信号过强，条带呈灼烧样。可降低抗体上样量。 2. 抗体浓 …

       嵌合抗原受体修饰的T（CAR-T）细胞对血液恶性肿瘤具有很强的抗肿瘤活性。然而，将这一成功转化为实体瘤仍然令人沮丧。在实体瘤的治疗中，CAR-T治疗面临着免疫抑制环境等巨大困难。在抑制环境的建立中，程序性死亡因子-1（pd-1）/程序性死亡因子配体1（pd-l1）轴被认为起关键作用。现分享一篇慢病毒感染（envirus）与PD-1和嵌合抗原受体 …

siRNA转染后细胞死亡，原因也是多样的，如脂质体毒性，转染浓度过高，转染前的细胞状态不佳等都可能导致转染后细胞死亡的情况发生，这种情况下就需要适当优化转染条件；可以选择细胞毒性小的非脂质体类的转染试剂，如纳米材料的Entranster试剂，另外，如果siRNA所靶向的基因对于维持细胞生长是非常重要的，出现细胞死亡的现象可能正是由于基因干扰引起的，如果由于细 …