首先siRNA由于只 …
阅读更多 »免疫球蛋白G ( IgG) 片段的水解(四)
基本方案4 胃蛋白酶水解IgG 获取F (ab’)2 片段的大量制备 材料 ≥1mg/ ml 纯化的IgG 适当pH 的乙酸缓冲液 : 0. 2mol/L 乙酸钠,用冰乙酸调至所需pH 2mol/L Tris 碱 PBS, pH8.0 蛋白A 交联琼脂糖凝胶CL-4B 半胱氨酸,可选 碘乙酰胺结晶,可选 聚丙烯酰胺葡聚糖S-200 Super …
阅读更多 »细胞培养的质量好坏是 …
阅读更多 »Q1: 一个孔中应接 …
阅读更多 »免疫共沉淀:当细胞在 …
阅读更多 »基本方案4 胃蛋白酶水解IgG 获取F (ab’)2 片段的大量制备 材料 ≥1mg/ ml 纯化的IgG 适当pH 的乙酸缓冲液 : 0. 2mol/L 乙酸钠,用冰乙酸调至所需pH 2mol/L Tris 碱 PBS, pH8.0 蛋白A 交联琼脂糖凝胶CL-4B 半胱氨酸,可选 碘乙酰胺结晶,可选 聚丙烯酰胺葡聚糖S-200 Super …
阅读更多 »基本方案3 胃蛋白酶水解IgG 成F(ab’)2 片段的摸索性试验 在此试验中摸索在两个不同pH 下IgG 的水解情况,因为IgG 在低pH 下会水解成Fab 片段或更小的片段。胃蛋白酶的水解比木瓜蛋白酶更剧烈,因此推荐的酶/抗体 (E/A) 比例以不超过1: 20 为佳。 注意:从IgG2b水解不能得到F (ab’)2 片段,用胃 …
阅读更多 »基本方案2 木瓜蛋白酶水解IgG 获取Fab 片段的大量制备 材料 木瓜蛋白酶 ( 2 X 重结晶悬液 ) 水解缓冲液:0.02mol/L EDTA ( 二钠盐) / 0.02mol/L 半胱氨酸/PBS (新鲜配制,冰上保存<10h) 溶于PBS 中浓度≥1mg/ml 的IgG ( 总量≥5mg ) 碘乙酰胺结晶 PBS, pH8. 0 蛋白A …
阅读更多 »基本方案1 木瓜蛋白酶水解IgG 成Fab 片段摸索性试验 此法适用于小鼠(任何亚类)、大鼠、人、山羊、绵羊、马、鸡、豚鼠和牛的 IgG 水解。 材料 保存于 PBS 中的 2mg/ml 纯化的lgG 木瓜蛋白酶 水解缓冲液:0. 02mol/L EDTA ( 二钠盐) / 0. 02mol/L 半胱氨酸/PBS (新鲜配制,冰上保存<10h) 溶 …
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