英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
多发性骨髓瘤（MM）是一种无法治愈的血液恶性肿瘤，其特点是恶性浆细胞克隆性增殖，与大多数患者产生单克隆免疫球蛋白有关。细胞因子白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-10、干扰素-α和B细胞活化因子（BAFF）在促进MM细胞生长和耐药中的作用已得到明确阐述。越来越多的证据表明BAFF影响MM细胞的生长、存活、迁移和耐药性。B细胞成熟抗原（BCMA）是BAFF …
阅读更多 »通过转染双链siRNA 在哺乳动物细胞中进行RNA 干扰
长链dsRNA 不能用于多数哺乳动物细胞中，这是由于它能诱导干扰素反应而引发基因表达和细胞凋亡的变化。本方案介绍了一种向哺乳动物细胞中转入短的双链siRNA 的方法，双链siRNA 因其长度过短而不能引起与dsRNA 相关的序列非特异性反应。本方案适用于24 孔板中生长的细胞。如果使用了其他规格的多孔板、培养瓶或者培养皿，则需要根据培养孔的表面积换算细胞密度 …
阅读更多 »siRNA转染效率不理想的原因
siRNA转染效率不理想，常见的原因有： 1. RNA与转染试剂比例不佳 由于RNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记，决定了RNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件，建议先进行预实验优化。 2. 细胞密度不佳 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调，但未成功转染的细胞却不受影响，这时转染效率 …
阅读更多 »RNA转染P4E6细胞效果图（Entranster）
细胞siRNA转染有哪些方法？
siRNA导入细胞有以下几种方法：化学转染技术、电穿孔法、磷酸钙共沉淀技术、显微注射和载体导入技术。选择时应该依据实验条件考虑以下因素：细胞对转入方式的承受能力、细胞对病毒侵染的易感性、细胞的生长特性等。对贴壁细胞来说化学转染技术（Entranster）是最为常用的方法，而对悬浮细胞则采用电穿孔法效果较好。
阅读更多 »RNA转染与B淋巴细胞刺激因子和多发性骨髓瘤研究
B淋巴细胞刺激因子（BLyS），一种肿瘤坏死因子超家族成员，是一种有效的体内外B细胞共活化剂，可诱导B细胞增殖和分泌免疫球蛋白。多发性骨髓瘤（MM）是一种无法治愈的晚期分化B细胞恶性肿瘤（浆细胞）。先分享一篇RNA转染（Entranster）与B淋巴细胞刺激因子（BLyS）和多发性骨髓瘤（MM）研究的文献，以供参考。
阅读更多 »RNA转染与多氯代二苯硫醚诱导活性氧和基因毒性研究
多氯化二苯硫化物（PCDPSS）是一类可以相互作用并激活芳基烃受体（AHR）的化学药物。之前的研究结果表明，PCDPSS可引起肝脏氧化应激。然而，有关PCDPSS基因毒性的信息是有限的。现分享一篇RNA转染（entranster）与多氯代二苯硫醚通过ahrcyp1a1途径可诱导活性氧和基因毒性研究的文献，以供参考。 文献地址：https://sc …
阅读更多 »RNA转染（Entranster）与乙型脑炎病毒和细胞凋亡研究
流行性乙型脑炎病毒（JEV）感染是一种以神经元死亡为特征的脑组织疾病。然而，人们对其基本机制知之甚少。现分享一篇RNA转染（Entranster）与乙型脑炎病毒和细胞凋亡研究的文献，以供参考。
阅读更多 »RNA转染（Entranster）与树突状细胞相关miRNA调节研究
表观遗传修饰在基因表达调控中起关键作用。为了了解表观遗传修饰在不同的环境中如何改变单核细胞来源的树突状细胞（DC）miRNA的表达，现分享一篇RNA转染（Entranster）与树突状细胞相关miRNA调节研究的文献，以供参考。
阅读更多 »RNA细胞转染实验影响因素
转染试剂 转染中要额外注意的就是转染试剂应该是确认无RNase污染的，而且也尽量避免和质粒DNA转染混用——即使试剂本身兼容DNA和RNA转染，因RNA与DNA大小不同，转染条件不同，所需的试剂也应不同，所以RNA专用的转染试剂会更好一些。比如Entranster-R4000. RNA转染时RNA的用量 RNA转染的用量必须参考RNA转染试剂说明，因为RNA …
阅读更多 »