根据不同的环境,树突状细胞(DC)可能变现为活跃或耐受性,但表观遗传修饰是否参与这些过程鲜为人知。现分享一篇siRNA转染(Entranster-R4000)与树突状细胞的表观遗传修饰研究的文献,显示表观遗传修饰可以调节人体单核细胞来源的DCs(DC)分化为活性或耐受DC。
阅读更多 »细胞siRNA转染有哪些方法?
siRNA导入细胞有以下几种方法:化学转染技术、电穿孔法、磷酸钙共沉淀技术、显微注射和载体导入技术。选择时应该依据实验条件考虑以下因素:细胞对转入方式的承受能力、细胞对病毒侵染的易感性、细胞的生长特性等。对贴壁细胞来说化学转染技术(Entranster)是最为常用的方法,而对悬浮细胞则采用电穿孔法效果较好。
阅读更多 »RNA转染与大鼠肺辐射损伤中microRNA和mRNA表达谱研究
暴露与辐射中会引起细胞反应,这可能受到基因表达网络的调控。miRNA是一种小的非编码RNA,通过促进mRNA的降解或抑制蛋白质的翻译来调节基因的表达。在放射性肺损伤中miRNA和mRNA的表达模式还不是很清楚,并且miRNA在这个过程中的作用还未有研究。现分享一篇RNA转染(Entranster)与大鼠肺辐 …
阅读更多 »siRNA转染与PKC-β抑制剂和心脏微血管功能研究
PKC-β抑制剂Ruboxistaurin(RBX或βLY333531)可防止糖尿病肾和视网膜微血管并发症。然而,RBX对糖尿病心肌微血管功能的影响尚不清楚。先分享一篇运用siRNA转染(Entranster)的方法与PKC-β抑制剂对糖尿病大鼠心脏微血管功能研究的文献,以供参考。
阅读更多 »siRNA转染与肝肺综合征有关的肺血管重构中细胞骨架蛋白研究
肝肺综合征(HPS)是肝病,肺内血管扩张(IPVD)和低氧血症的三联征,动脉低氧血症可引起肺血管重构(PVR)。在最近的研究中,与HPS有关的PVR中肺动脉平滑肌细胞增殖中的作用已确定;细胞骨架蛋白的变化在细胞增殖中起着重要的作用。但与HPS有关的PVR中细胞骨架蛋白表达与分子机制相关性知之甚少。现分享一篇siRNA转染(Entranster)与细胞骨架蛋白 …
阅读更多 »怎么样做好siRNA细胞转染实验?
1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致siRNA转染实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在,如皮 …
阅读更多 »RNA转染与多氯代二苯硫醚诱导活性氧和基因毒性研究
多氯化二苯硫化物(PCDPSS)是一类可以相互作用并激活芳基烃受体(AHR)的化学药物。之前的研究结果表明,PCDPSS可引起肝脏氧化应激。然而,有关PCDPSS基因毒性的信息是有限的。现分享一篇RNA转染(entranster)与多氯代二苯硫醚通过ahrcyp1a1途径可诱导活性氧和基因毒性研究的文献,以供参考。 文献地址:https://sc …
阅读更多 »如果细胞密度低,铺板48h可以转染吗?
如果细胞密度较低,一般来说,细胞在转染前的培养时间是很关键的。48小时的培养时间通常是足够的,但是否适合转染还要考虑几个因素: 1. 细胞的生长状态 细胞在转染时最好处于对数生长期,也就是细胞在活跃分裂和增殖中。若细胞密度过低,可能会处于生长迟缓或衰退状态,这会影响转染效率。 细胞密度太低(<30%):如果细胞太少,可能会影响转染试剂的吸附和细胞的转染 …
阅读更多 »miRNA转染(Entranster)与白细胞介素IL-23受体和甲状腺炎研究
Hashimoto甲状腺炎(HT)是一种典型的器官特异性自身免疫性疾病,其特征是自身对甲状腺抗原的耐受性降低。白细胞介素IL-23受体(IL-23R)越来越被认为是自身免疫性疾病的一个关键点,包括Hashimoto甲状腺炎(HT)。然而,调节IL-23R表达的分子机制尚不清楚。现分享一篇miRNA转染(Entranster-R4000)与白细胞介 …
阅读更多 »siRNA转染后细胞出现死亡是什么原因?
siRNA转染后细胞死亡,原因也是多样的,如脂质体毒性,转染浓度过高,转染前的细胞状态不佳等都可能导致转染后细胞死亡的情况发生,这种情况下就需要适当优化转染条件;可以选择细胞毒性小的非脂质体类的转染试剂,如Entranster试剂,另外,如果siRNA所靶向的基因对于维持细胞生长是非常重要的,出现细胞死亡 …
阅读更多 »