英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
悬浮细胞的siRNA转染操作步骤，以24孔板siRNA转染为例 1.提前1天细胞种植 悬浮细胞：采用对数生长期的细胞，数量为常规培养细胞数的1/3进行转染实验。如某细胞常规培养的细胞数是6×105，那么就用2×105的细胞进行转染。 2.转染过程 ⑴取0.67ug(50pmol)的siRNA，加入一定量无血清稀释液，充分混匀，制成RNA稀释液，终体积为25μ …
阅读更多 »体内转染与巨噬细胞和人支气管上皮细胞肿瘤转化研究
肺癌是发病率和死亡率增长最快，对人群健康和生命威胁最大的恶性肿瘤之一。肺肿瘤发生是一个复杂的过程，包括基因突变或表观遗传变化等多种因素，导致细胞失控增殖、恶性转化和肿瘤转移。其他研究表明，慢性炎症与肝脏和肠道的肿瘤发生密切相关，而许多流行病学研究表明，慢性炎症可能在肺肿瘤发生中起关键作用。现分享一篇运用体内转染（Entranster）方法研究巨噬细胞和人支气 …
阅读更多 »siRNA转染后细胞出现死亡是什么原因？
siRNA转染后细胞死亡，原因也是多样的，如脂质体毒性，转染浓度过高，转染前的细胞状态不佳等都可能导致转染后细胞死亡的情况发生，这种情况下就需要适当优化转染条件；可以选择细胞毒性小的非脂质体类的转染试剂，如Entranster试剂，另外，如果siRNA所靶向的基因对于维持细胞生长是非常重要的，出现细胞死亡 …
阅读更多 »RNA转染mir-148b在非霍奇金淋巴（NHL）放射敏感性中作用的研究
非霍奇金淋巴瘤（NHL）是具有很强异质性的一组独立疾病的总称。依据细胞来源将其分为三种基本类型：B细胞、T细胞和NK/T细胞NHL。临床大多数NHL为B细胞型，占总数70%～85%。NHL对放疗敏感。越来越多的证据表明mirRNA在调节细胞放射敏感性中起重要作用。现上传一篇RNA转染（Entranster …
阅读更多 »ECL发光液（enlight）与巨噬细胞迁移抑制因子和弓形虫病研究
弓形虫是一种细胞内原生动物，属于顶端复合体门。这种寄生虫能感染各种温血哺乳动物，包括人类、牲畜和鸟类。据统计，世界上大约三分之一的人口是血清阳性。这种寄生虫在免疫功能低下的病人身上会引起严重的症状，在感染的孕妇身上也会导致流产。此外，流行病学调查的结果表明，弓形虫病的流行给畜牧业造成了巨大的经济损失。 目前，药物（嘧啶、磺胺嘧啶和螺旋 …
阅读更多 »细胞电转染效率不高的原因是什么？
细胞电转染效率不高，有可能是以下原因造成的： 1. 不合适的电场强度 合适的电场强度对于电转染实验非常重要，电场强度不能过高，过高会增加细胞的死亡率；也不能过低，过低不能增加膜的通透性或在膜上形成小孔。不同细胞系具有不同的最佳场强值，实验前应测定所转染细胞系的最佳电场强度。 2. 细胞选择错误 用于电转的细胞一般选取处于对数生长期的细胞（15代以内，传代后2 …
阅读更多 »体内转染（entranster）与GATA-4调节脑出血后神经元凋亡研究
GATA结合蛋白4（GATA-4）是GATA转录因子家族的成员，在正常大脑中表达，参与神经炎症反应和衰老。然而，关于GATA-4是否与脑出血（ICH）引起的脑损伤有关的研究很少。现分享一篇体内转染（entranster）与GATA-4调节脑出血后神经元凋亡研究的文献，以供参考。其研究的目的是在体内和体外探讨GATA-4在ICH诱导的继发性脑损伤（SBI）中的 …
阅读更多 »体内转染与高温和遗传性雌性牙鲆雄性化过程中GSDF表达研究
在脊椎动物中，性别决定和分化是非常可塑的，取决于遗传和环境影响的结合。温度作为性腺发育早期的一个重要环境因素，可能会凌驾于基因性别决定机制之上，改变许多硬骨动物的表型性别。据报道，尼罗罗非鱼、斑马鱼和日本比目鱼的基因雌性后代在性腺分化的关键时期在高温下被饲养时，已完全性转化为功能雄性。尽管实际的温度依赖性决定机制尚不清楚，但性反转鱼类的一个共同 …
阅读更多 »动物体内转染后，遗传性状能维持多久？
体内转试剂Entranster转染动物时是属于瞬时的转染，对目标基因的改变，一般注射1次，可以维持7天左右。随后，随着转入的核酸的代谢，效应减弱消失。动物是否回复到原有的生理状态，这与目标基因有关系。如果希望长期维持动物的转染状态，可多次注射。
阅读更多 »体内转染siRNA （Entranster）的方法研究肺微血管内皮功能
小GTP酶Rab5可以控制囊泡接到的质膜蛋白运输，其在血管内皮（VE）-钙黏蛋白的内化作用功能仍然未知，血管内皮（VE）-钙黏蛋白是一种内皮特异性跨膜元件，可以调节内皮细胞的极性和屏障功能。现分享一篇应用体内转染siRNA （Entranster-in vivo）的方法研究肺微血管内皮功能的文献，以供参考。
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