1. RNA与转染试剂比例不佳 由于RNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记,决定了RNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件,建议先进行预实验优化。 2. 细胞密度不佳 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调,但未成功转染的细胞却不受影响,这 …
阅读更多 »ECL发光液与精胺改善心肌梗死后的心脏功能障碍研究
精胺是一种天然多胺,在哺乳动物细胞中含量丰富,参与细胞生长、增殖和再生。最近,口服精胺补充剂可通过增强自噬通量对年龄相关的心脏功能障碍具有心脏保护作用。然而,精胺对心肌梗死(MI)后心肌损伤和心脏功能障碍的影响仍不清楚。现分享一篇ECL发光液(enlight)与精胺改善心肌梗死后的心脏功能障碍研究的文献,以供参考。 文献地址:https://b …
阅读更多 »一个抑制脑中风的miRNA
MicroRNAs(miRNAs)是一类非编码小RNA,miRNAs能结合到靶基因mRNA的3’非翻译区诱导转录退化和/或抑制翻译。miRNA在多种病理生理过程中发挥着重要的作用。 Let-7c是最丰富且高度保守的miRNA。以往的研究表明,let-7c通过调节细胞增殖和细胞凋亡抑制癌细胞存活率。最近研究表明Let-7c是巨噬细胞极化的重要调节器。 Let- …
阅读更多 »体内转染与高危大鼠角膜移植和CD25siRNA基因转移作用研究
角膜移植术是治疗致盲性角膜疾病的唯一方法。虽然角膜移植被认为是最常见和最成功的移植手术,但角膜移植的成功率低于一般预期。根据临床统计,88%的角膜移植片在移植后能存活1年,但只有55%的角膜移植片能存活5年。三分之一的角膜损伤是由免疫移植反应引起的。此外,高危受者角膜移植的成功率在35%以下,抑制角膜移植排斥反应是提高移植成功率的主要挑战。现分享 …
阅读更多 »体内转染与巨噬细胞和人支气管上皮细胞肿瘤转化研究
肺癌是发病率和死亡率增长最快,对人群健康和生命威胁最大的恶性肿瘤之一。肺肿瘤发生是一个复杂的过程,包括基因突变或表观遗传变化等多种因素,导致细胞失控增殖、恶性转化和肿瘤转移。其他研究表明,慢性炎症与肝脏和肠道的肿瘤发生密切相关,而许多流行病学研究表明,慢性炎症可能在肺肿瘤发生中起关键作用。现分享一篇运用体内转染(Entranster)方法研究巨噬细胞和人支气 …
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与整合素αvβ3和微重力相关骨丢失研究
机械刺激和生物因素协同调节骨的发育和再生,但其基础机制却知之甚少。微重力诱导骨丢失,这可能地与抗局部细胞因子的发展有关,包括胰岛素样生长因子1(IGF-1)。现分享一篇RNA转染(Entranster)与整合素αvβ3和微重力相关骨丢失研究的文献,以供参考。
阅读更多 »RNA转染与BAFF和BCMA结合诱导多发性骨髓瘤研究
多发性骨髓瘤(MM)是一种无法治愈的血液恶性肿瘤,其特点是恶性浆细胞克隆性增殖,与大多数患者产生单克隆免疫球蛋白有关。细胞因子白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10、干扰素-α和B细胞活化因子(BAFF)在促进MM细胞生长和耐药中的作用已得到明确阐述。越来越多的证据表明BAFF影响MM细胞的生长、存活、迁移和耐药性。B细胞成熟抗原(BC …
阅读更多 »电转染实验过程影响因素
1 电场参数 电场是电转染的重要因素,细胞在电场的作用下,膜通透性增加或是形成小孔,以完成转染过程。因此电场强度是应该被优化的主要参数。电场强度不能过高,过高会增加细胞的死亡率;也不能过低,过低不能增加膜的通透性或在膜上形成小孔。因此,一个适宜的电场强度至关重要。 不同细胞系具有不同的最佳场强值,其确定方法除了实验直接测定比较不同场强下转染率的高低外,还可以 …
阅读更多 »转导细胞的检测分析
1. 制备载体储备液。 2. 以每个靶细胞不同的MOI 或载体剂量转导靶细胞。 腺病毒载体: 100~ 10 000 个病毒颗粒/靶细胞。腺相关病毒载体: 10 000~ 100 000 个病毒基因组/靶细胞。慢病毒载体: MOI5 ~ 500 。 3 在转导后3 ~ 5 天对转入基因的表达进行评价。 对于载体编码蛋白质,有多种方法可用来评价转导细胞中转入基 …
阅读更多 »体内转染与细胞程序性死亡因子5与细胞自噬和大鼠缺血性损伤研究
卒中尤其是缺血性卒中,可能导致严重的神经功能障碍,甚至死亡,在世界范围内有较高的发病率和死亡率。脑缺血后神经元凋亡、自噬、坏死等形态学变化产生细胞死亡的复杂特征。细胞自噬参与了II型程序性细胞死亡,并且在脑缺血中,自噬作用在累积。自噬作用是复杂的,取决于大脑的成熟度,区域的缺血严重程度等。现分享一篇运用体内转染(Entranster),脑室注射方法研究细胞程 …
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