英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
1. RNA与转染试剂比例不佳 由于RNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记，决定了RNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件，建议先进行预实验优化。 2. 细胞密度不佳 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调，但未成功转染的细胞却不受影响，这 …
阅读更多 »动物实验系列篇章之五——实验动物的采血法
实验研究中，经常要采集实验动物的血液进行常规质量检测、细胞学实验或进行生物化学分析，故必须掌握正确的采集血液的技术。采血方法的选择，主要决定于实验的目的和所需血量以及动物种类。 一、大鼠、小鼠的采血方法 (一)剪尾采血：需血量很少时常用本法，如作红、白细胞计数、血红蛋白测定、制作血涂片等可与此法。动物麻醉后，将尾尖剪去约5mm，从尾部向尾尖部按摩，血即从断端 …
阅读更多 »细胞DNA转染实验影响因素
1.细胞密度 一般来说，当细胞密度达到60%～80%时进行转染可以取得较高的转染效率，过低或过高都会影响转染效果。 2.细胞状态 这点非常关键，很多时候传代次数太少或者太多都将导致细胞对转染试剂敏感度的改变。因此，为了提高转染效率以及转染稳定性、降低细胞毒性，应尽量使用适度传代的细胞系，并在不同次实验时保持细胞传代次数的一致性。 还有，尽量选择无 …
阅读更多 »体内转染与大鼠脊髓损伤后神经细胞凋亡和行为恢复研究
外伤性脊髓损伤（T-SCI）是世界范围内常见的一种损伤，常导致严重的神经功能缺损和渐进性退化。T-SCI的病理是原发性损伤和继发性损伤的结果。原发性损伤指的是直接导致脊髓结构损伤，包括细胞死亡、局部轴索损伤、血管破裂以及损伤部位周围的局灶性出血。继发性损伤是由原发性损伤引起的各种分子、细胞和生化反应引起的 …
阅读更多 »DNA转染（entranster）与MYC相互作用蛋白-锌指因子ZNF121和上皮细胞增殖研究
MYC是一种强有力的癌基因蛋白，调节多种细胞过程，包括增殖、凋亡、分化、干细胞特性、衰老和迁移。MYC主要作为转录因子发挥作用，与大量蛋白质相互作用，MYC相互作用蛋白的鉴定和对于理解MYC功能是非常重要的。现分享一篇DNA转染（entranster）与MYC相互作用蛋白-锌指因子ZNF121和上皮细胞增殖研究的文献，以供参考。
阅读更多 »RNA转染与B淋巴细胞刺激因子和多发性骨髓瘤研究
B淋巴细胞刺激因子（BLyS），一种肿瘤坏死因子超家族成员，是一种有效的体内外B细胞共活化剂，可诱导B细胞增殖和分泌免疫球蛋白。多发性骨髓瘤（MM）是一种无法治愈的晚期分化B细胞恶性肿瘤（浆细胞）。先分享一篇RNA转染（Entranster）与B淋巴细胞刺激因子（BLyS）和多发性骨髓瘤（MM）研究的文献，以供参考。
阅读更多 »体内转染（Entranster）与小胶质细胞活化防止脑缺血损伤研究
缺血性中风是导致全球范围内死亡和残疾的主要原因之一，是一个重大的公共卫生问题。为了阐明了缺血性脑损伤的病理机制，科研人员付出了巨大的努力。为此，针对中风引起的神经炎症是治疗中风的一个有吸引力的策略。现分享一篇体内转染（Entranster）与小胶质细胞活化防止脑缺血损伤研究的文献，以供参考。
阅读更多 »RNA转染与BAFF和BCMA结合诱导多发性骨髓瘤研究
多发性骨髓瘤（MM）是一种无法治愈的血液恶性肿瘤，其特点是恶性浆细胞克隆性增殖，与大多数患者产生单克隆免疫球蛋白有关。细胞因子白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-10、干扰素-α和B细胞活化因子（BAFF）在促进MM细胞生长和耐药中的作用已得到明确阐述。越来越多的证据表明BAFF影响MM细胞的生长、存活、迁移和耐药性。B细胞成熟抗原（BC …
阅读更多 »提高RNA转染效率的几点建议
1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在，如皮肤，头发，所有徒手接触过 …
阅读更多 »体内转染（entranster）与荷花碱通过调节nrf2信号对缺血性卒中线粒体的保护作用研究
缺血性中风是导致死亡和长期残疾的主要原因。为了克服临床治疗的局限性，迫切需要有前景的神经保护化合物。神经保护剂仅限于单一靶向药物，这进一步限制了其临床疗效。由于大脑特殊的能量需求，以线粒体为中心的能量微环境是缺血性脑卒中复杂病理学研究的新热点。现分享一篇体内转染（entranster）与荷花碱通过调节nrf2信号对缺血性卒中线粒体的保护作用研究的文献，以供参 …
阅读更多 »