嘌呤信号能够引起炎症和免疫反应。卫星胶纸细胞(SGCs)中的P2X嘌呤受体7(P2X7)的激活可能是促进炎症和神经性疼痛中一个必不可少的组成部分。长链非编码RNAs(lncRNAs)参与多种生理和病理过程。现分享一篇针对lncRNA BC168687的小干扰RNA(Entranster)对高糖和高游离脂肪酸环境下卫星胶纸细胞P2X7受体表达的影响的文献,以供 …
阅读更多 »荧光表达的细胞在冻存后72小时后再测荧光情况,可以吗?
荧光表达后的细胞可以在冻存后72小时再测荧光,但有几点需要注意: 细胞存活率:冻存和解冻过程可能会影响细胞的存活率和状态。确保细胞在解冻后恢复良好,具有正常的形态和活力。 荧光稳定性:荧光蛋白的稳定性可能会随时间或细胞状态的变化而有所改变。确保荧光信号在解冻后仍然足够强且稳定。 冻存条件:使用适当的冻存保护剂(如DMSO)并在-80°C或液氮中冻存,以尽量减 …
阅读更多 »提高慢病毒感染细胞效率的方法
可使用病毒感染增强剂envirus提高病毒的感染效率,下面以慢病毒为例,说一下实验过程。 1.提前一天细胞铺板 提前一天将细胞种植在24孔板中,以感染时细胞融合度在50%左右为宜(悬浮细胞根据需要调整,不要采用过高的细胞密度)。 2.感染 ⑴将2ul的Envirus-LV用25μl无血清稀释液稀释,充分混匀,制成Envirus-LV稀释液。4℃静置5分钟。 …
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与丹参酮IIA在肿瘤细胞凋亡中的作用研究
丹参酮 IIA(Tanshinone IIA,Tan IIA)是一种从丹参干根中提取的生物活性物质,具有抑制肿瘤细胞增殖和诱导细胞凋亡的作用。然而,Tan IIA在肿瘤细胞凋亡中的作用机制仍有待进一步阐明。现分享一篇运用RNA转染(Entranster)的方法的文献,通过阐明Tan IIA在p53基因缺陷的H1299细胞中的抗肿瘤作用机制,以确定丹参酮IIA …
阅读更多 »RNA转染与表观遗传学分析和非洲绿猴抗艾滋病机制研究
非洲绿猴(African Green Monkeys, AGM)是猿免疫缺陷病毒(SIV)的天然宿主,虽然SIV复制水平较高,但不会发展为艾滋病。在健康成年AGM中观察到CD4(+)T细胞的降低和CD8(dim) T细胞升高,这可能部分解释了SIV诱导的疾病进展的缺失。阐明使这种天然宿主与SIV共存而无进展性疾病发生的机制可能有助于了解艾滋病的 …
阅读更多 »体内转染与山奈酚保护小鼠免受d-galn/lps诱导的急性肝功能衰竭影响研究
急性肝功能衰竭(ALF)是一种严重的临床综合征,其特点是无原发性肝病患者肝细胞大量坏死,肝功能明显失代偿,其发病率和死亡率均较高。迄今为止,除了肝移植外,没有有效的治疗方法。因此,寻找治疗ALF的有效药物尤为重要。山奈酚是一种黄酮类化合物,具有抗炎、抗氧化等作用。在肝病治疗中,山奈酚在不同的肝病中有不同的作用。然而,关于山奈酚对ALF影响的研究还很少。现分享 …
阅读更多 »ECL发光液(enlight)与丙戊酸钠增强肝细胞脂肪变性研究
丙戊酸钠(Valproate,VPA)是一种广谱抗癫痫药物,已广泛应用于各种抽搐,双极性,或分裂情感障碍等癫痫的治疗。据报道,VPA治疗是一个长期的过程,甚至需要终身服药。然而,在整个VPA抗癫痫治疗过程中会发生药物不良反应(ADR),如肝毒性、肥胖、出血性胰腺炎、骨髓抑制和血氨过多性脑病。其中肝毒性是限制丙 …
阅读更多 »Entranster-in vivo体内转染和病毒体内转染的比较
EntransterTM-in vivo体内转染和病毒体内转染的比较 英格恩动物转染试剂和病毒感染比较 英格恩动物转染试剂 病毒感染 实验周期 最快3天就可以出结果 需要进行克隆、病毒包装等一系列实验,周期短则1个月,长则达数月。 灵活性 更换核酸简单,利于筛选。 更换核酸序列,需要重新构建和包装病毒,复杂而且费工费时。 效果 方法简单,实验环节少,尤其在转 …
阅读更多 »BHK-21细胞的电转染条件是什么?
使用Entranster-E电转液与指数衰减脉冲电转仪时BHK-21细胞的电转染条件是:对于0.2 cm电转杯,细胞密度为10×10^6 cells/ml,DNA用量为2μg,电转液体积为100μl,电压为150V, 电容为950μF。对于0.4 cm电转杯,细胞密度为10×10^6 cells/ml,DNA用量为5μg,电转液体积为25 …
阅读更多 »siRNA转染效率不理想的原因
siRNA转染效率不理想,常见的原因有: 1. RNA与转染试剂比例不佳 由于RNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记,决定了RNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件,建议先进行预实验优化。 2. 细胞密度不佳 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调,但未成功转染的细胞却不受影响,这时转染效率 …
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