英格恩技术资料

1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在，如皮肤，头发，所有徒手接触过 …

尽管缺血性中风是全世界死亡的主要原因之一，但缺血再灌注（I/R）脑损伤的致病机制仍不清楚。消皮素D（Gasdermin D，GSDMD）是caspase-11（非异常炎症体）和caspase-1（典型炎症体）下游的热致死亡执行的重要因素，可能与I/R损伤有关。现分享一篇体内转染（entranster）与GSDMD在I/R损伤中的作用及可能的潜在机制研究的文献 …

       炎症性肠病（IBD）与遗传背景、免疫系统和生活方式，包括饮食和其他环境因素有关。它包括溃疡性结肠炎（UC）和Crohn病（CD），以肠慢性炎症为特征。在过去的半个世纪里，IBD的全球发病率稳步上升。有几种药物用于治疗IBD，包括氨基水杨酸盐、皮质类固醇、抗生素和免疫调节剂。然而，这些药物不仅对IBD患者具有有益的作用，而还具有显著的副作用，因此 …

       三氯乙烯（TCE）是一种挥发性有机化学试剂，已广泛应用于工业有机溶剂中，是大气、土壤、地下水和食品中的常见污染物。由于肝脏是主要的TCE靶器官之一，TCE引起的肝损伤在职业工作者中经常被报道，TCE暴露被怀疑与肝癌的风险增加有关。在动物实验中，TCE处理可诱导小鼠肝细胞癌（HCC），但其机制尚不清楚。现分享一篇RNA转染（Entranster） …

       昆虫的发育、变态和繁殖主要受幼激素（JH）和20-羟蜕皮酮（20E）的控制。虽然20E能引起幼虫/若虫蜕皮和变态，但JH通过抑制20E的变质作用来维持幼体的形态。JH也能刺激许多昆虫物种的雌性生殖方面，包括发育前的发育、卵黄生成和卵发生。尽管人们对20E基因中的miRNA调控机制已经有了一定的了解，但对于miRNA与JH基因中的JH信号通路的相 …

      长链非编码RNA(lncRNA)是一类转录本长度超过200nt的RNA分子，它们并不编码蛋白，而是以RNA的形式在多种层面上（表观遗传调控、转录调控以及转录后调控等）调控基因的表达水平。LncRNA ASBEL已经被鉴定为编码抗增殖蛋白的BTG3（B细胞易位基因3）基因的反义转录物。 有报道称，在三阴性乳腺癌（TNBC）中BTG3显著下调。现分享 …

多发性硬化（Multiple sclerosis，MS）是中枢神经系统的一种慢性脱髓鞘性神经变性疾病。虽然MS的确切发病机制尚不清楚，但CD4 + T细胞介导的自身免疫被认为是发病机制中最重要的方面之一。哺乳动物非编码microRNAs（miRNAs）可参与免疫系统的功能。miR-155的表达与病人多发性硬化症疾病的严重程度和小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎（E …

MicroRNAs（miRNAs）是一类非编码小RNA，miRNAs能结合到靶基因mRNA的3’非翻译区诱导转录退化和/或抑制翻译。miRNA在多种病理生理过程中发挥着重要的作用。 Let-7c是最丰富且高度保守的miRNA。以往的研究表明，let-7c通过调节细胞增殖和细胞凋亡抑制癌细胞存活率。最近研究表明Let-7c是巨噬细胞极化的重要调节器。 Let- …

siRNA转染效率不理想，常见的原因有： 1. RNA与转染试剂比例不佳 由于RNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记，决定了RNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件，建议先进行预实验优化。 2. 细胞密度不佳 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调，但未成功转染的细胞却不受影响，这时转染效率 …

小干扰RNA（siRNA）是通过RNA干扰（RNAi）在体外和体内抑制特定蛋白质合成的有力工具，由于RNAi利用天然途径，即在蛋白质翻译发生之前，在转录后水平上关闭基因表达，因此，siRNA诱导下调基因表达对基础研究和应用研究有着巨大的影响。siRNA及其递送系统的化学修饰已被建议用于改善细胞内siRNA递送和药代动力学性质。现分享一篇体内转染（Entran …