英格恩技术资料

1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在，如皮肤，头发，所有徒手接触过 …

使用Entranster-E电转液与指数衰减脉冲电转仪时Jurkat E6-1细胞的电转染条件是： 对于0.2 cm电转杯，细胞密度为10×10^6 cells/ml，DNA用量为2μg，电转液体积为100μl，电压为150V， 电容为950μF。 对于0.4 cm电转杯，细胞密度为10×10^6 cells/ml，DNA用量为5μg，电 …

越来越多的骨缺损患者需要骨移植。然而，骨移植，骨缺损的金标准，承担相当大的风险；供体部位疼痛和发病率，感染，增加失血，以及更长的操作时间。最常见的选择是使用人体尸体骨（同种异体骨），它有额外的缺点，包括排斥反应，有限的供应，以及潜在的疾病传播。因此，生理和化学性质与自体骨相似的动物骨（异种移植物）成为兴趣的焦点。但免疫原性和疾病传播的固有并发症也阻碍了该方法 …

       血管内皮由单层内皮细胞组成，是血液和所有组织之间的重要界面。EC是一种典型的多功能细胞，具有重要的基础和诱导代谢和合成功能。当暴露于物理和化学信号，细胞能够产生一个广泛的，可以调节多种生理过程的因素，包括血流量、血管张力、细胞粘附、抗血栓和血管平滑肌细胞增殖。内皮细胞的异常活化和功能障碍与各种血管炎症性疾病有关，如脓毒症、动脉粥样硬化、糖尿病、 …

哮喘是一种常见的慢性呼吸道炎症性疾病其特点是喘息，气促、胸闷、咳嗽，以及呼气气流受限。研究认为哮喘是一种异质性疾病，具有不同的发病机制。淫羊藿甙是从淫羊藿中分离的一种黄酮苷，已报道具有抗骨质疏松、抗炎和抗抑郁的功能。现分享一篇ECL发光液（Enlight）与淫羊藿苷对哮喘小鼠慢性气道炎症的抑制作用研究的文献，以供参考。

        去分化软骨肉瘤（DDCs）是一种特殊类型的肉瘤，约占传统软骨肉瘤（CCS）的10%～15%。DDCs是一种由两种不同成分组成的肿瘤，一种与低级别CCS相邻的恶性肿瘤，两部分之间有清晰的边界。由于早期转移而对化疗缺乏反应，DDCS预后差，5年生存率仅为10%～24%。因此，迫切需要探索 …

      败血性休克的特点是血管功能障碍，凝血障碍，多器官衰竭，最后死亡。细菌感染和随之产生的内毒素（脂多糖[lps]）暴露是败血症的原发原因，对lps的严重炎症反应被认为是败血症休克的重要介质。血管功能障碍，包括全身性低血压和肺动脉高压（PAH），是败血性休克的威胁生命的疾病。发现脂多糖诱导的炎症可影响肺动脉高压患者的血管内皮功能。然而，目前尚不清楚LP …

下面以Entranster-R4000试剂为例，说一下mRNA转染步骤（24孔板） 1.提前1天细胞种植 贴壁细胞：提前一天将细胞种植在24孔板中，以转染时细胞汇合度（Confluence）在30％左右为宜，转染前全培养基总量为0.45ml。 悬浮细胞：采用对数生长期的细胞，数量为常规培养细胞数的1/3进行转染实验。如某细胞常规培养的细胞数是6×105，那么 …

随着生活、工作方式的改变及社会人口的老龄化，骨关节退行性病变已成为高发疾病，其中代表性疾病之一为骨性关节炎（osteoarthritis, OA）。最近研究表明：WISP-１ 具有促进关节软骨破坏的作用 。WISP-１ 在正常软骨和滑膜中几乎不表达，而在退变的软骨及滑膜（如OA）中WISP-１异常增高，通过诱导ＭＭＰs及aggrecanases的分泌而促进胶 …

  体外研究骨是困难的，因为它包含参干扰的各种细胞类型。骨生物连接各种器官，因此，骨骼生理学必须以完整的方式在完整的动物中进行研究。现分享一篇体内转染（Entranster）与siRNA沉默和骨骼基因功能评估研究的文献，以供参考。