病毒表达系统 腺病毒(Adenovirus) 慢病毒(Lentivirus) 腺相关病毒(Adeno-As sociate virus) 病毒基因组 双链DNA病毒 RNA病毒 单链DNA病毒 复制 条件复制 不可复制 条件复制 滴度 最高可达1012pfu/ml 最高可达109TU/ml 最高可达1012-13v.g/ml 感染细胞类型 感染分裂和不分裂细 …
阅读更多 »ECL发光液与重组弓形虫CDPK3接种对实验性弓形虫保护性免疫研究
弓形虫是一种普遍存在的、专性的细胞内病原体,可感染包括人在内的几乎所有的恒温动物。目前尚未有特效药物或疫苗能够防控弓形虫病。钙依赖性蛋白激酶(CDPKs)广泛的存在于植物、绿藻和顶复门原虫中,且不存在哺乳动物中。CDPKs在钙离子的调控下,主要参与入侵、胞内增值、逸出、运动和蛋白分泌等重要生物功能的调节。由于其不存在于哺乳动物中,CDPKs成为 …
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与骨髓瘤细胞中RAF6蛋白表达水平研究
肿瘤坏死因子受体‑相关因子6(TRAF6)是一种重要的E3泛素连接酶 ,在先天免疫和适应性免疫中有着重要的作用 。TRAF6被报道可参与鳞状细胞癌和胃癌的侵袭性生长和转移,以及骨髓增生异常综合征和急性髓系白血病 。由于TRAF6在众多的信号转导通路具有很重要的地位,使得它成为肿瘤治疗的一个潜在靶点。现分享 …
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与IL-17下调小鼠胶原性关节炎嗅间充质干细胞的免疫抑制能力研究
嗅间充质干细胞(OE-MSCs)是嗅觉固有层中一种新的常驻干细胞类型。OE-MSCs通过调节T细胞的反应,包括调节性T细胞(Treg)的上调和Th1/Th17细胞的下调而发挥其免疫抑制能力。作为炎性细胞因子,IL-17在胶原诱导性关节炎(CIA)的发展过程中起着关键的作用。然而,目前尚不清楚IL-17水平的升高是否会影响OE-MSCs在炎症状态下的免疫抑制功 …
阅读更多 »动物体内转染实验研究
随着分子生物学的飞速发展,基因功能和基因治疗研究越来越收到人们的重视。人们尝试各种体内外方法探知相关基因及其生物特性。体外实验相对容易操作,体内相关研究目前主要有:动物体内转染和基因敲除动物。 基因敲除动物 基因敲除动物是通过DNA同源重组或基因的插入突变和RNAi原理制备,或通过诱导剂诱导获得。基因敲除动物可以实现基因的完全敲除,条件性基因敲除,基因 定点 …
阅读更多 »慢病毒载体构建原理
慢病毒载体的包装系统一般由两部分组成,即包装成分和载体成分。包装成分由HIV-1基因组去除了包装、逆转录和整合所需的顺式作用序列而构建,能够反式提供产生病毒颗粒所必需的蛋白;载体成分则与包装成分互补,即含有包装、逆转录和整合所需的顺式作用序列,同时具有异源启动子控制下的多克隆位点及在此位点插入的目的基因。将包装成分与载体成分的多个质粒共转染包装 …
阅读更多 »体内转染(Entranster)与小胶质细胞M2极化和脑炎性保护作用研究
小胶质细胞介导的炎症会导致脑出血(ICH)继发性损伤。活化的小胶质细胞在脑损伤和修复中具有促炎症(M1)和抗炎(M2)的双重功能。miR-124是一种有效的在脑损伤后抗小胶质细胞的抗炎药。然而,ICH后小胶质细胞的M1/M2极化的调节作用还未见报道。现分享一篇体内转染(Entranster)与小胶质细胞M2极化和脑炎性保护作用研究的文献,以供参考。
阅读更多 »AAV载体中启动子和特殊原件的含义是什么?
hsyn:神经元特异启动子; GFAP:星形胶质细胞特异启动子; Ubiquitin:一种常用的组成型启动子。 IRES:内部核酶进入位点,起到连接两个基因,在一个启动子驱动下转录的作用。IRES连接的两个基因不会融合表达,IRES的RNA可以招募核糖体,翻译下游基因,但是IRES是一种再招募的过程,其后基因的mRNA的翻译量低于自身mRNA的数量,所以表达 …
阅读更多 »Bio Factors | 浙江大学医学院陈高教授团队报道:创伤性脊髓损伤的潜在治疗剂
陈高教授团队在《Bio Factors》期刊上发表了题为“MANF attenuates neuronal apoptosis and promotes behavioral recovery via Akt/MDM-2/p53 pathway after traumatic spinal cord injury in rats“的论文。文章通 …
阅读更多 »细胞DNA转染实验步骤
下面以Entranster-H4000,DNA转染试剂为例,简要说明DNA细胞转染实验步骤 1.提前一天细胞铺板 提前一天将细胞种植在24孔板中,以转染时细胞密度在60%左右为宜。 2.转染过程 ⑴将0.8μg的DNA用25μl无血清稀释液稀释,充分混匀,制成DNA稀释液。 注意:无血清稀释液建议采用OPTI-MEM、无血清DMEM或1640。 ⑵将2μl的 …
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