英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致siRNA转染实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在，如皮 …
阅读更多 »RNA转染（Entranster）与骨髓瘤细胞中TRAF6蛋白表达水平研究
肿瘤坏死因子受体相关因子6（TRAF6）是一种重要的E3泛素连接酶 ，在先天免疫和适应性免疫中有着重要的作用 。TRAF6被报道可参与鳞状细胞癌和胃癌的侵袭性生长和转移，以及骨髓增生异常综合征和急性髓系白血病 。由于TRAF6在众多的信号转导通路具有很重要的地位，使得它成为肿瘤治疗的一个潜在靶点。现分享一篇RNA转染（Entranster）与骨髓 …
阅读更多 »Hela细胞的电转染条件是什么？
使用Entranster-E电转液与指数衰减脉冲电转仪时Hela细胞的电转染条件是： 对于0.2 cm电转杯，细胞密度为3×10^6 cells/ml，DNA用量为2μg，电转液体积为100μl，电压为130V， 电容为950μF。 对于0.4 cm电转杯，细胞密度为3×10^6 cells/ml，DNA用量为5μg，电转液体积为250μ …
阅读更多 »体内转染（engreen）与miR-943-3p和过敏性哮喘研究
哮喘是一种和呼吸相关症状有关的慢性气道疾病，如呼气气流受限；预计到2025年，影响哮喘患者总数将达到4亿以上。尽管所有年龄组的哮喘发病率都很高，但老年患者表现出更严重的症状。到目前为止，包括遗传学和环境因素在内的几个因素都参与了哮喘的进展，但哮喘的发病机制在很大程度上还不清楚。过敏性炎症和气道重塑是哮喘的两个基本特征。炎症细胞（主要包括嗜酸性粒 …
阅读更多 »ECL发光液（enlight）与DNA酶1和糖尿病研究
脱氧核糖核酸酶I（DNaseI）是38 kDa糖蛋白的非限制性核酸酶。它可以水解单链和双链DNA中的磷酸二酯键。内源性DNA酶I是促进细胞凋亡过程中染色质分解的核酸内切酶之一。作为分泌型内切酶，DNaseⅠ是体液中主要的核酸酶，如血清和尿液。在人类中，胰腺是DNASi I的合成和分泌的主要来源，占血清中D …
阅读更多 »电转染时，指数衰减脉冲形式的电转条件是什么？
对于engreen的Entranster-E电转染试剂，当使用0.4cm比色杯时，大多数细胞类型的指数衰减脉冲条件在200-300V的电压范围和800-1000μF的电容范围内。对于0.2 cm比色杯时，其范围分别为80-160 V和800-1000μF。对于使用0.4 cm比色杯的电穿孔实验，测试电压范围 …
阅读更多 »RNA转染与mir-34a通过靶向Foxp3损害Treg/Th17平衡研究
调节性T（Treg）细胞亚群及其特异性转录Foxp3是通过控制效应器T（Teff）细胞反应维持免疫稳态的独特细胞类型。尽管有Treg/teff紊乱的Treg细胞中的缺陷通常会导致自身免疫性疾病，但其确切机制尚未完全揭示。现分享一篇RNA转染（entranster）与mir-34a通过靶向Foxp3损害Treg/Th17平衡研究的文献，以供参考。 …
阅读更多 »怎么根据病毒的TCID50计算给毒的MOI值
根据病毒的TCID50值计算给毒的MOI（Multiplicity of Infection，感染倍数）通常需要几个步骤。MOI 是指每个宿主细胞上平均感染的病毒颗粒数。 步骤概述： 知道病毒的TCID50值：TCID50 是一种病毒活性的度量，表示每单位体积（通常为每毫升）病毒悬液中，能在 50% 的细胞文化中引起感染的病毒数量。单位通常是病毒颗粒数/毫升 …
阅读更多 »RNA转染与大鼠肺辐射损伤中microRNA和mRNA表达谱整合研究
暴露与辐射中会引起细胞反应，这可能受到基因表达网络的调控。miRNA是一种小的非编码RNA，通过促进mRNA的降解或抑制蛋白质的翻译来调节基因的表达。在放射性肺损伤中miRNA和mRNA的表达模式还不是很清楚，并且miRNA在这个过程中的作用还未有研究。现分享一篇RNA转染（Entranster）与大鼠肺辐射损伤中microRNA和mRNA表达谱 …
阅读更多 »体内转染（Entranster）与杜鹃花中总黄酮对心肌缺血再灌注损伤的保护作用研究
杜鹃花总黄酮是从杜鹃花的花朵中提取的有效成分，对家兔和大鼠脑缺血或者心肌损伤具有明显的保护作用。然而，其心肌保护作用机制仍不清楚。现分享一篇体内转染（Entranster）与杜鹃花中总黄酮对心肌缺血再灌注损伤的保护作用研究的文献，以供参考。
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