1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致siRNA转染实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在,如皮 …
阅读更多 »Theranostics | 关于1型糖尿病的新发现
复旦大学儿童医院儿科研究所的团队在《Theranostics》上发表了题为“Circular RNA circPPM1F modulates M1 macrophage activation and pancreatic islet inflammation in type 1 diabetesmellitus”的论文。文章阐明了 …
阅读更多 »悬浮细胞的siRNA转染步骤
悬浮细胞的siRNA转染操作步骤,以24孔板siRNA转染为例 1.提前1天细胞种植 悬浮细胞:采用对数生长期的细胞,数量为常规培养细胞数的1/3进行转染实验。如某细胞常规培养的细胞数是6×105,那么就用2×105的细胞进行转染。 2.转染过程 ⑴取0.67ug(50pmol)的siRNA,加入一定量无血清稀释液,充分混匀,制成RNA稀释液,终体积为25μ …
阅读更多 »体内转染与异甘草素和大鼠早期脑损伤研究
脑内出血(Intracerebralhemorrhage,ICH)可引起有效的氧化应激反应和炎症过程,异甘草素(Isoliquiritigenin)是一种类黄酮物质,可以激活核因子E2相关因子2(Nrf2)介导的抗氧化系统,负调控核因子B(NF-κBκκ)和NOD受体家族。现分享一篇体内转染(Entranster)与异甘草素和大鼠早期脑损伤研究的文献,以供参 …
阅读更多 »体内转染(Entranster)与mir-200c在乳腺癌细胞上皮间质转化中作用中研究
MirRNAs不仅参与肿瘤的形成,也与肿瘤的分化和侵袭过程有关。然而,目前检测miRNA表达的方法有很大的缺点,如侵入性和不可再生性。上皮间质转化(EMT)在肿瘤转移和耐药方面具有重要作用。现分享一篇体内转染(Entranster)与mir-200c在乳腺癌细胞上皮间质转化中作用中研究的文献,以供参考。
阅读更多 »体内转染与mir-301a抑制和脑缺血/再灌注大鼠的神经保护作用研究
脑缺血病具有发病率高、致残率高、死亡率高等特点,其主要治疗原则是恢复缺血区的血液再灌注。但一旦发生脑缺血,血液再灌注短期恢复后神经损伤会进一步加重,称为脑缺血再灌注(I/R)损伤。总的来说,脑I/R损伤的病理生理机制非常复杂,在I/R损伤过程中涉及到各种元素,如氧化应激、凋亡和炎症反应。更重要的是,炎症反应和细胞凋亡被认为是诱发脑I/R损伤的主要 …
阅读更多 »ECL发光液与睫状体神经营养因子和阿尔兹海默症治疗研究
通过其病理特征,即老年斑和神经纤维缠结来抑制阿尔茨海默病(AD)进展,是一种有效的治疗方法。许多研究表明睫状体神经营养因子(CNTF)不仅能够促进神经元生长和维持细胞存活,还可显著降低淀粉样蛋白β(Aβ)聚集和沉积。现分享一篇ECL发光液(enlight)与睫状体神经营养因子和阿尔兹海默症治疗研究的文献,以供参考。
阅读更多 »体内转染与mirRNA-93对小鼠心肌微血管内皮细胞损伤作用研究
心肌炎是一种通常由病毒感染或病毒感染后的免疫反应导致心脏炎症疾病,是导致扩张性心肌病的重要原因。最近的研究也认为心肌炎是导致运动员心脏性猝死(SCD)的主要原因。现分享一篇体内转染mirRNA-93(Entranster)对小鼠心肌微血管内皮细胞损伤作用的研究的文献,以供参考。
阅读更多 »ECL发光液(enlight)与LncRNA拯救肝损伤并促进肝细胞增殖研
肝损害对人类健康产生不利影响,在世界范围内发病率很高。它可由多种有毒物质引起的,例如酒精和活性氧。持续性肝损伤可导致大范围肝细胞损害,伴随严重纤维化和不可逆性肝硬化,常导致死亡。影响肝损害的很多因素现在仍不清楚,这阻碍了治疗。因此,更好地了解肝损伤的相关因素对于治疗相关的肝脏疾病至关重要。现分享一篇ECL发光液(enlight)与LncRNA拯救肝损伤并促进 …
阅读更多 »Entranster-in vivo体内转染和病毒体内转染的比较
EntransterTM-in vivo体内转染和病毒体内转染的比较 英格恩动物转染试剂和病毒感染比较 英格恩动物转染试剂 病毒感染 实验周期 最快3天就可以出结果 需要进行克隆、病毒包装等一系列实验,周期短则1个月,长则达数月。 灵活性 更换核酸简单,利于筛选。 更换核酸序列,需要重新构建和包装病毒,复杂而且费工费时。 效果 方法简单,实验环节少,尤其在转 …
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