英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
病毒转染原理及步骤 在细胞相关的实验操作中，对于一些按常规方法难以转染甚至无法转染的细胞，通过病毒介导的实验能够大大提高基因的转导效率，以达到目的基因的高效瞬时表达。 病毒转染包括以下步骤：1构建载体 2包装提纯病毒 3感染靶细胞。以慢病毒为例。 慢病毒（Lentivirus）载体是以HIV-1（人类免疫缺陷I型病毒）为基础发展起 …
阅读更多 »病毒转染原理及步骤
提高RNA转染效率的几点建议
1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在，如皮肤，头发，所有徒手接触过 …
阅读更多 »Stem Cell Research & Therapy | 中国人民解放军总医院：如何改善肾间质纤维，防止肾衰老？
发表在《Stem Cell Research & Therapy 》期刊的“Regulation of connective tissue growth factor expression by miR-133b for thetreatment of renal interstitial fibrosis in aged mice …
阅读更多 »DNA转染（Entranster）与微管稳定性研究
微管介导的细胞事件如细胞内转运和细胞极性的维持高度依赖于微管的稳定性，微管稳定性由细胞中微管相关蛋白（MAPs）的集合控制。MAP7结构域蛋白3（Mdp3）近来被认为是微管稳定性的关键调节因子。然而，如何实现这一功能仍然是不清楚的。现分享一篇DNA转染（Entranster）与微 …
阅读更多 »RNA转染（Entranster）与树突状细胞相关的miRNA调节研究
表观遗传修饰在基因表达调控中起关键作用。为了了解表观遗传修饰在不同的环境中如何改变单核细胞来源的树突状细胞（DC）miRNA的表达，现分享一篇RNA转染（Entranster）与树突状细胞相关的miRNA调节研究的文献，以供参考。
阅读更多 »如何通过电穿孔转染DNA？
试剂 运载 DNA l0mg/mL 细胞生长培养基 电穿孔缓冲液 指数生长的培养细胞 线性化或环状质粒DNA ( 1 ~ 5μg/μL , 溶于无菌去离子水） 磷酸盐缓冲液( PBS ) 胰岛素 设备 电穿孔杯 电穿孔仪器 血细胞计数器 组织培养皿或多孔培养板 组织培养瓶（75cm2） 方法 准备电穿孔用细胞。 对于贴壁细胞 电穿孔前一天，通过胰酶消化释放贴 …
阅读更多 »体内转染siRNA （Entranster）的方法研究肺微血管内皮功能
小GTP酶Rab5可以控制囊泡接到的质膜蛋白运输，其在血管内皮（VE）-钙黏蛋白的内化作用功能仍然未知，血管内皮（VE）-钙黏蛋白是一种内皮特异性跨膜元件，可以调节内皮细胞的极性和屏障功能。现分享一篇应用体内转染siRNA （Entranster-in vivo）的方法研究肺微血管内皮功能的文献，以供参考。
阅读更多 »体内转染（Entranster）与肺癌细胞凋亡研究
肺癌是最常见的恶性肿瘤之一，是全世界范围内恶性肿瘤死亡原因的首位，非小细胞肺癌约占肺癌病例的80%。肺癌被认为是一种遗传疾病，内源性致病基因的异常表达导致基因组的不稳定性，从而增加癌细胞的运动性和侵袭性。尽管可以成功治疗原发性恶性肿瘤，但仍有四分之一以上的患者在术后复发和远处转移。现分享一篇运用体内转染（Entranster-in vivo）的方 …
阅读更多 »体内转染（Entranster）与冠状动脉微栓塞相关的心功能不全研究
冠状动脉微栓塞（CME）是一种常见的临床事件，可自发或由程序相关的动脉粥样硬化斑块破裂急性冠状动脉综合征患者，特别是在经皮冠状动脉介入治疗（PCI）导致。大隐静脉移植物经皮介入治疗的发生率高达45%。由CME引起的短暂“无血流”或“慢血流”是急性心肌梗死患者长期预后不良的独立预测因素。此外，CME还可导致渐进性心肌功能异常，包括显性心肌梗死、收缩功能障碍、心 …
阅读更多 »siRNA转染与成纤维细胞瘤细胞l929-a研究
L929成纤维细胞瘤细胞（l929-a）和L929纤维肉瘤细胞（l929-n）是不同的细胞系，常用于肿瘤坏死的细胞毒性因子α（TNFα）的研究，TNFa已被报道可诱导两种细胞系的坏死。然而，当比较TNFα诱导的在这两个细胞系的细胞死亡时，l929-n表现出典型的RIP3依赖性细胞坏死，在l929-a中却不是 …
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