英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在，如皮肤，头发，所有徒手接触过 …
阅读更多 »细胞电转染实验效率不理想的原因
1. 不合适的电场强度 合适的电场强度对于电转染实验非常重要，电场强度不能过高，过高会增加细胞的死亡率；也不能过低，过低不能增加膜的通透性或在膜上形成小孔。不同细胞系具有不同的最佳场强值，实验前应测定所转染细胞系的最佳电场强度。 2. 细胞选择错误 用于电转的细胞一般选取处于对数生长期 …
阅读更多 »体内转染（engreen）与异甘草素和大鼠早期脑损伤研究
脑内出血（Intracerebral hemorrhage，ICH）可引起有效的氧化应激反应和炎症过程，异甘草素（Isoliquiritigenin）是一种类黄酮物质，可以激活核因子E2相关因子2（Nrf2）介导的抗氧化系统，负调控核因子B（NF-κBκκ）和NOD受体家族。现分享一篇体内转染（Entranster-in vivo）与异甘草素和 …
阅读更多 »DNA转染与干细胞自我更新和多能性维持的研究
干细胞是一类具有自我更新能力和多向分化潜能的原始细胞，包括胚胎干细胞、成体干细胞和诱导多能干细胞（IPS）。干细胞具有非常重要的理论研究意义和临床应用价值。利用胚胎干细胞建立多种细胞类型的体外分化系统，使人们能够在细胞和分子水平上研究哺乳动物的发育过程；不同发育阶段的细胞可确定胚胎发 …
阅读更多 »动物体内转染实验研究
随着分子生物学的飞速发展，基因功能和基因治疗研究越来越收到人们的重视。人们尝试各种体内外方法探知相关基因及其生物特性。体外实验相对容易操作，体内相关研究目前主要有：动物体内转染和基因敲除动物。 基因敲除动物 基因敲除动物是通过DNA同源重组或基因的插入突变和RNAi原理制备，或通过诱导剂诱导获得。基因敲除动物可以实现基因的完全敲除，条件性基因敲除，基因 定点 …
阅读更多 »siRNA转染至细胞有哪些方法？
siRNA导入细胞有以下几种方法：化学转染技术、电穿孔法、磷酸钙共沉淀技术、显微注射和载体导入技术。选择时应该依据实验条件考虑以下因素：细胞对转入方式的承受能力、细胞对病毒侵染的易感性、细胞的生长特性等。对贴壁细胞来说化学转染技术（Entranster）是最为常用的方法，而对悬浮细胞则采用电穿孔法效果较好 …
阅读更多 »DNA转染试剂对比
由此可见，Entranster-H4000具有更好的转染效果。
阅读更多 »体内转染（Entranster）与小胶质细胞M2极化和脑炎性保护作用
小胶质细胞介导的炎症会导致脑出血（ICH）继发性损伤。活化的小胶质细胞在脑损伤和修复中具有促炎症（M1）和抗炎（M2）的双重功能。miR－124是一种有效的在脑损伤后抗小胶质细胞的抗炎药。然而，ICH后小胶质细胞的M1/M2极化的调节作用还未见报道。现分享一篇体内转染（Entranster）与小胶质细胞M2 …
阅读更多 »RNA转染（Entranster）与三氯乙烯和肝癌发生的研究
三氯乙烯（TCE）是一种挥发性有机化学试剂，已广泛应用于工业有机溶剂中，是大气、土壤、地下水和食品中的常见污染物。由于肝脏是主要的TCE靶器官之一，TCE引起的肝损伤在职业工作者中经常被报道，TCE暴露被怀疑与肝癌的风险增加有关。在动物实验中，TCE处理可诱导小鼠肝细胞癌（HCC），但其机制尚不清楚。现分享一篇RNA转染（Entranster） …
阅读更多 »体内转染（Entranster）与CREB1基因沉默对血管性痴呆小鼠认知功能障碍的影响研究
血管性痴呆（VD）是老年痴呆的第二大病因，仅次于阿尔茨海默病（AD），在西方国家占所有痴呆病例的17.6%，研究表明在世界东部地区，包括中国和日本人口中，认知功能障碍的人数要更多。认知功能障碍广泛被认为是痴呆患者的经典特征。VD，以各种脑血管疾病为特征的损伤综合征主要与缺血性脑血管疾病相关。目前，VD的确切发病机制仍不清楚。因此，有必要更详细 …
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