非洲绿猴(African Green Monkeys, AGM)是猿免疫缺陷病毒(SIV)的天然宿主,虽然SIV复制水平较高,但不会发展为艾滋病。在健康成年AGM中观察到CD4(+)T细胞的降低和CD8(dim) T细胞升高,这可能部分解释了SIV诱导的疾病进展的缺失。阐明使这种天然宿主与SIV共存而无进展性疾病发生的机制可能有助于了解艾滋病的 …
阅读更多 »体内转染与mir-301a抑制和脑缺血/再灌注大鼠的神经保护作用研究
脑缺血病具有发病率高、致残率高、死亡率高等特点,其主要治疗原则是恢复缺血区的血液再灌注。但一旦发生脑缺血,血液再灌注短期恢复后神经损伤会进一步加重,称为脑缺血再灌注(I/R)损伤。总的来说,脑I/R损伤的病理生理机制非常复杂,在I/R损伤过程中涉及到各种元素,如氧化应激、凋亡和炎症反应。更重要的是,炎症反应和细胞凋亡被认为是诱发脑I/R损伤的主要 …
阅读更多 »siRNA细胞转染效率低下的原因
1. RNA与转染试剂比例不佳 由于RNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记,决定了RNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件,建议先进行预实验优化。 2. 细胞密度不佳 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调,但未成功转染的细胞却不受影响,这 …
阅读更多 »RNA转染与BAFF和BCMA结合诱导多发性骨髓瘤细胞存活研究
多发性骨髓瘤(MM)是一种无法治愈的血液恶性肿瘤,其特点是恶性浆细胞克隆性增殖,与大多数患者产生单克隆免疫球蛋白有关。细胞因子白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10、干扰素-α和B细胞活化因子(BAFF)在促进MM细胞生长和耐药中的作用已得到明确阐述。越来越多的证据表明BAFF影响MM细胞的生长、存活、迁移和耐药性。B细胞成熟抗原(BCM …
阅读更多 »RNA转染效率低的原因是什么?
RNA转染效率低,可能的原因: · 转染试剂不适合。建议选择RNA专用转染试剂,如Entranster试剂。 · 转染试剂和RNA的量不够,或者比例不对。优化实验条件,调整试剂和RNA用量,优化二者比例。 · 检测时间有问题。适当调整检测时间。 · RNA质量问题。选择纯度高的RNA。 · 细胞状态不佳。调整细胞状态,调整细胞融合度。
阅读更多 »成功转染siRNA的主要关键点有什么?
1.设计合成有效的siRNA RNAi的核心需要siRNA对相应mRNA进行有效的结合和作用。siRNA的设计合成首先很重要,最优的设计可以用最小的工作浓度取得满意的沉默效果,减少副反应的发生。siRNA的设计可以通过检索,优先选用经过验证的siRNA或设计多对siRNA。需要强调的是,需要同时设置阴性对照以排除非特异沉默现象和阳性对照以确认整个实验体系的有 …
阅读更多 »动物实验系列篇章之七—— 实验动物的处死
当实验中途停止或结束时,实验者应站在实验动物的立场上以人道的原则去处置动物,原则上不给实验动物任何恐怖和痛苦,也就是要施行安乐死。安乐死是指实验动物在没有痛苦感觉的情况下死去。实验动物安乐死方法的选择取决于动物的种类与研究的课题。 一、蛙 类 常用金属探针插入枕骨大孔,破坏脑脊髓的方法处死。将蛙用湿布包住,露出头部,左手执蛙,并用食指按压其头部前端,拇指按压 …
阅读更多 »RNA转染与B淋巴细胞刺激因子和多发性骨髓瘤研究
B淋巴细胞刺激因子(BLyS),一种肿瘤坏死因子超家族成员,是一种有效的体内外B细胞共活化剂,可诱导B细胞增殖和分泌免疫球蛋白。多发性骨髓瘤(MM)是一种无法治愈的晚期分化B细胞恶性肿瘤(浆细胞)。先分享一篇RNA转染(Entranster)与B淋巴细胞刺激因子(BLyS)和多发性骨髓瘤(MM)研究的文献,以供参考。
阅读更多 »RNA转染(entranster)与SASH1引起病理性色素沉着研究
p53转录调节蛋白与大量细胞内其他信号转导途径相互作用,并且有很多正负自我反馈调节作用于p53反应。p53直接控制由紫外线(UV)导致的POMC /αMSH产物并和非紫外线因素导致的的病理性色素沉着相关。现分享一篇RNA转染(entranster)与SASH1引起病理性色素沉着研究的文献,以供参考。
阅读更多 »体内转染与小鼠基因表达光调控研究
小干扰RNA(siRNA)在基因功能研究和药物开发方面扮演着重要的角色。最近,通过化学修饰作用设计出对光不稳定的siRNA,从时间和空间上来阐明基因额沉默过程。现分享一篇体内转染(Entranster)与小鼠基因表达光调控研究的文献,以供参考。
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