英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
1.设计合成有效的siRNA RNAi的核心需要siRNA对相应mRNA进行有效的结合和作用。siRNA的设计合成首先很重要，最优的设计可以用最小的工作浓度取得满意的沉默效果，减少副反应的发生。siRNA的设计可以通过检索,优先选用经过验证的siRNA或设计多对siRNA。需要强调的是，需要同时设置阴性对照以排除非特异沉默现象和阳性对照以确认整个实验体系的有 …
阅读更多 »成功转染siRNA的主要关键点有什么？
细胞DNA转染注意事项
1）优化条件：质粒不同，所转染的细胞不同及定量的准确性等因素会导致在一些情况下所做的转染不在该优化条件内。这种情况下需要对质粒转染试剂的配比进行优化。另外，可选用更合适的转染试剂，如Entranster试剂。 2）抑制剂：不要在用于制备DNA-转染试剂复合物的培养基中使用抗生素，EDTA，柠檬酸盐，磷酸盐，RPMI，硫酸软骨素，透明质酸，硫酸葡聚糖或其他硫酸 …
阅读更多 »有了它，就能不断发射争对各种病毒的疫苗
2021年2月25日，陈薇团队研发的重组新冠病毒疫苗（腺病毒载体）获批上市。她说：“这个平台好比火箭发射平台，有了它，就能不断「发射」争对各种病毒的疫苗。” 过去的几十年间，复制缺陷的人类重组腺病毒V5（HadV5）已经成为一种广泛应用在真核基因表达分析、疫苗研究等领域的模式系统。这种经修饰后的腺病毒，其E1和E3基因已被移除，依然具备细胞感染的能力，但产生 …
阅读更多 »体内转染与血红素氧合酶-1和中性粒细胞气道炎症研究
过敏性哮喘通常被认为是以嗜酸性炎症为特征的Th2免疫应答。最近的研究表明，Th17细胞在非嗜酸性粒细胞哮喘（NEA）的发病机制中起重要作用，可导致类固醇耐药的中性粒细胞气道炎症。血红素氧合酶-1（HO-1）具有抗炎、抗氧化和抗凋亡作用。然而，其在NEA中的作用尚不清楚。 现分享一篇体内转染（Entranster）与血红素氧合酶-1对卵清蛋白诱导的中性粒细胞气 …
阅读更多 »ECL发光液与幽门螺杆菌抑制TRAF1的裂解研究
胃癌是世界范围内最常见的恶性肿瘤之一，也是导致癌症死亡的第三大原因。幽门螺杆菌（H.pylori）是一种革兰氏阴性、螺旋状的病原体，是慢性胃炎、胃溃疡、黏膜相关淋巴组织淋巴瘤和胃癌的一个强有力的危险因素。幽门螺杆菌的致病机制主要取决于细菌间的相互作用。因素和宿主细胞。幽门螺杆菌（H. …
阅读更多 »动物体内转染注射技巧
尾静脉注射时请掌握注射技巧，一般选用远端1/3 处静脉注射，如感觉到阻力和轻微隆起，请停止注射，重新寻找静脉进行操作，不要强力推注，否则容易将药液注射在尾部，导致尾部溃烂。注射完成后移去针头，按压针孔10 秒以上，防止药液流出。局部注射，尽可能多注射药液，有利于提高转染效果 …
阅读更多 »细胞siRNA转染有哪些方法？
siRNA导入细胞有以下几种方法：化学转染技术、电穿孔法、磷酸钙共沉淀技术、显微注射和载体导入技术。选择时应该依据实验条件考虑以下因素：细胞对转入方式的承受能力、细胞对病毒侵染的易感性、细胞的生长特性等。对贴壁细胞来说化学转染技术（Entranster）是最为常用的方法，而对悬浮细胞则采用电穿孔法效果较好。
阅读更多 »ECL发光液（enlight）与内毒素和肺动脉狭窄研究
败血性休克的特点是血管功能障碍，凝血障碍，多器官衰竭，最后死亡。细菌感染和随之产生的内毒素（脂多糖[lps]）暴露是败血症的原发原因，对lps的严重炎症反应被认为是败血症休克的重要介质。血管功能障碍，包括全身性低血压和肺动脉高压（PAH），是败血性休克的威胁生命的疾病。发现脂多糖诱导的炎症可影响肺动脉高压患者的血管内皮功能。然而，目前尚不清楚LP …
阅读更多 »RNA转染与水通道蛋白1和肺动脉平滑肌细胞迁移研究
肝肺综合征（HPS）以肺内血管扩张（IPVD）引起的动脉氧合缺陷为特征。肺血管重塑（PVR）是IPVD的一个重要病理特征，然而，有关该过程的内在机制的细节尚不明确。现分享一篇RNA转染（Entranster）与水通道蛋白1和肺动脉平滑肌细胞迁移研究的文献，以供参考。
阅读更多 »体内转染与儿茶酚丁胺影响神经性疼痛机制研究
神经性疼痛（NPP）是许多中枢神经系统损伤或疾病的结果。以往的研究表明，NPP是由p2x4受体介导的，p2x4受体在背根神经节（DRG）的卫星胶质细胞（sgcs）上表达。儿茶酚丁胺（CST）是一种神经内分泌多功能肽，可能参与了NPP的发病机制。现分享一篇体内转染（engreen）与儿茶酚丁胺影响神经性疼痛机制研究的文献，以供参考。 文献地址：ht …
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