人鼻病毒(HRV)是属于Picornaviridae家族肠道病毒属的单链正义RNA病毒。它在20世纪50年代首次被发现。将近60年后,已经鉴定出超过100种血清型/基因型病毒。HRVs(HV-A,-B,-C)是所有年龄组,尤其是儿童中呼吸道感染最常见的原因,但尚未开发出有效的治疗HVS的药物。现分享一篇RN …
阅读更多 »体内转染与巨噬细胞和人支气管上皮细胞肿瘤转化研究
肺癌是发病率和死亡率增长最快,对人群健康和生命威胁最大的恶性肿瘤之一。肺肿瘤发生是一个复杂的过程,包括基因突变或表观遗传变化等多种因素,导致细胞失控增殖、恶性转化和肿瘤转移。其他研究表明,慢性炎症与肝脏和肠道的肿瘤发生密切相关,而许多流行病学研究表明,慢性炎症可能在肺肿瘤发生中起关键作用。现分享一篇运用体内转染(Entranster)方法研究巨噬细胞和人支气 …
阅读更多 »细胞RNA转染实验注意事项
1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在,如皮肤,头发,所有徒手接触过 …
阅读更多 »ECL发光液(enlight)与鼻腔倒乳头状瘤恶变为鳞状细胞癌研究
鼻腔肿瘤是一种罕见的恶性肿瘤,每年全球发病率约为1/10万。组织学上,鼻腔肿瘤分为肉瘤、嗅神经母细胞瘤、粘膜黑色素瘤和癌。鼻腔肿瘤中55%以上为癌,包括鳞状细胞癌(SCC)、腺癌和腺样囊性癌,倒置乳头状瘤(IP)是鼻腔和鼻窦常见的良性肿瘤。IPS的恶性转化率小于27%,但其转化过程中涉及的组织形态学、免疫组化及生物学标记尚不清楚。因此,探索ips …
阅读更多 »体内转染(Entranster)与放射增强质粒DNA转染肿瘤研究
迄今为止,大多数基因治疗临床试验都使用了病毒载体,但仍存在多种担忧,包括致癌风险、急性免疫原性、广泛的组织亲嗜性、DNA包装能力有限,以及安全处理和大规模生产的挑战。对于将基因疗法转化为临床治疗来说,改进这些缺点的DNA传递的替代方法是至关重要的。现分享一篇体内转染(Entranster)与放射增强质粒DNA转染肿瘤研究的文献,以供参考。
阅读更多 »细胞DNA转染效率影响因素
1.组织培养试剂 优化细胞生长条件。只使用新鲜配制的培养基和添加剂,并经可能减少所用试剂的变更。 基础培养基—目前所使用的各种市售培养基(如,RPMI 1640和DMEM)。培养基的成分包括营养物质(氨基酸,葡萄糖),维生素,无机盐,和缓冲物质。有些成分非常不稳定,因此如果不在使用时新鲜加入就可能会产生问题。务必要使培养基避光保存。因为已知有一些组分和缓冲物 …
阅读更多 »慢病毒、腺病毒、AAV 的检测周期分别是多长?
慢病毒 腺病毒 腺相关病毒 外源基因表达时间 2-4天开始表达长时间稳定表达 1-2天开始表达 持续7-14天 7-14开始表达 细胞分裂不旺盛部位可长时间表达 AAV一般注射动物后,会在1周左右开始表达,体内实验一般建议感染后3-4周看第一批结果。持续时间可以长达两年以上。在体内,细胞的生存周期会很长,特别是一些神经元细胞。所以只要细胞不死,AAV基本 …
阅读更多 »RNA转染与丹参酮IIA在肿瘤细胞凋亡中的作用研究
丹参酮 IIA(Tanshinone IIA,Tan IIA)是一种从丹参干根中提取的生物活性物质,具有抑制肿瘤细胞增殖和诱导细胞凋亡的作用。然而,Tan IIA在肿瘤细胞凋亡中的作用机制仍有待进一步阐明。现分享一篇运用RNA转染(Entranster)的方法的文献,通过阐明Tan IIA在p53基因缺陷的H1299细胞中的抗肿瘤作用机制,以确定丹参酮IIA …
阅读更多 »体内转染(Entranster)与去分化软骨瘤进展研究
去分化软骨肉瘤(DDCs)是一种特殊类型的肉瘤,约占传统软骨肉瘤(CCS)的10%~15%。DDCs是一种由两种不同成分组成的肿瘤,一种与低级别CCS相邻的恶性肿瘤,两部分之间有清晰的边界。由于早期转移而对化疗缺乏反应,DDCS预后差,5年生存率仅为10%~24%。因此,迫切需要探索CCS发展成为DDCS并找到新的治疗方法。现分享一篇体内转染(Entrans …
阅读更多 »细胞DNA转染实验步骤
下面以Entranster-H4000,DNA转染试剂为例,简要说明DNA细胞转染实验步骤 1.提前一天细胞铺板 提前一天将细胞种植在24孔板中,以转染时细胞密度在60%左右为宜。 2.转染过程 ⑴将0.8μg的DNA用25μl无血清稀释液稀释,充分混匀,制成DNA稀释液。 注意:无血清稀释液建议采用OPTI-MEM、无血清DMEM或1640。 ⑵将2μl的 …
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