质粒的构建:启动子的选择 启动子的选择对于转染基因的有效表达是非常重要的。对于转染过程本身虽然无甚影响,但是对转染结果却有着微妙的影响。 质粒的大小和质量 线性化还是超螺旋会影响转染结果:超螺旋质粒的转染效率比线性DNA高得多,特别是瞬时转染。而线性化DNA转染的整合几率高。质粒太大了转染会困难一些。毕竟,相对致密、较小的外源异物被细胞内吞的几率要大一些。如 …
阅读更多 »siRNA转染效率不理想怎么办?
siRNA转染效率不理想,常见的原因有: 1. RNA与转染试剂比例不佳 由于RNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记,决定了RNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件,建议先进行预实验优化。 2. 细胞密度不佳 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调,但未成功转染的细胞却不受影响,这时转染效率 …
阅读更多 »ECL发光液(enlight)与猪繁殖与呼吸综合征病毒与胆固醇-25-羟化酶研究
猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)是一种免疫调节性病原体,已被公认为调节宿主干扰素(IFN)系统。胆固醇-25-羟化酶(CH25H)是一种重要的干扰素刺激基因(ISG)编码多面体膜蛋白,显著抑制许多病毒的复制。最新研究表明,CH25H抑制PRRSV的复制,同时PRRSV的感染可显著下调CH25H的表达,但涉及CH25H下调的病毒蛋白尚不清楚。现分享一篇EC …
阅读更多 »动物体内转染试剂entranster-invivo的主要特点
●最快3天可以得到结果,核酸+转染试剂,注射动物,完成转染。 ● 肝、肾、心、肺,血液系统,神经系统,生殖系统,皮肤…成功应用。 ● 可方便、快捷更换不同的小片断RNA进行动物试验。 ● 方法先进,抛弃病毒,众多实验室应用,稳定可靠。 ● 比使用病毒节省90%以上费用,时间缩短到3天!
阅读更多 »RNA转染与食管鳞状细胞癌的生长抑制和放射增敏作用研究
食管癌是世界范围内最常见的恶性肿瘤之一,预后差。化疗耐药和癌症复发是其治疗中最困难的问题之一。识别潜在的分子机制是发展新疗法的关键。现分享一篇RNA转染(Entranster)与食管鳞状细胞癌的生长抑制和放射增敏作用研究的文献,以供参考。
阅读更多 »ECL发光液(Enlight)与五味子醇乙促进肝再生研究
肝再生是肝损伤后恢复的重要过程,是肝部分切除术(PHx)后的一种很有前景的临床策略。五味子醇乙(Schisandrol B,SOLB)是从华中五味子提取的一种生物活性成分,对小鼠药物性肝损伤具有明显的肝保护作用。然而,SOLB对PHx肝再生的影响尚不清楚。现分享一篇ECL发光液(Enlight)与五味子醇乙促进肝再生研究的文献,以供参考。
阅读更多 »ECL发光液使用过程中注意事项
1. 发光液不宜暴露于强光下时间过久,请避光保存,在暗室操作。 2. 为了得到最佳的曝光效果,优化一抗、二抗的稀释比例。 3. 请选择高质量保鲜膜。 4. 对于Enlight发光液,应避免使用NaN3 回收HRP 偶联的抗体,因为NaN3 能抑制HRP 的活性。
阅读更多 »慢病毒感染后72小时,效率低,细胞已经长满,有什么办法补救?
在慢病毒感染后72小时感染效率较低、细胞已经长满的情况下,可以尝试以下几个措施来提高感染效率并优化实验条件: 细胞传代或重新播种:如果细胞已经长满(汇合度较高),可能会影响慢病毒的感染效率。可以将细胞进行传代,重新播种在新的培养板上,使其达到较低的汇合度(例如30-50%),然后再进行感染。 优化感染时的MOI(Multiplicity of Infecti …
阅读更多 »体内转染与单cRGD修饰笼状siRNA的光调节研究
小干扰RNA(siRNA)是通过RNA干扰(RNAi)在体外和体内抑制特定蛋白质合成的有力工具,由于RNAi利用天然途径,即在蛋白质翻译发生之前,在转录后水平上关闭基因表达,因此,siRNA诱导下调基因表达对基础研究和应用研究有着巨大的影响。siRNA及其递送系统的化学修饰已被建议用于改善细胞内siRNA …
阅读更多 »体内转染(Entranster)与siRNA沉默和骨骼基因功能评估研究
体外研究骨是困难的,因为它包含参干扰的各种细胞类型。骨生物连接各种器官,因此,骨骼生理学必须以完整的方式在完整的动物中进行研究。现分享一篇体内转染(Entranster)与siRNA沉默和骨骼基因功能评估研究的文献,以供参考。 文献地址:https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5125699/
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