siRNA导入细胞有以下几种方法:化学转染技术、电穿孔法、磷酸钙共沉淀技术、显微注射和载体导入技术。选择时应该依据实验条件考虑以下因素:细胞对转入方式的承受能力、细胞对病毒侵染的易感性、细胞的生长特性等。对贴壁细胞来说化学转染技术(Entranster)是最为常用的方法,而对悬浮细胞则采用电穿孔法效果较好。
阅读更多 »RNA转染影响因素
1.转染试剂 转染中要额外注意的就是转染试剂应该是确认无RNase污染的,而且也尽量避免和质粒DNA转染混用—即使试剂本身兼容DNA和RNA转染,因RNA与DNA大小不同,转染条件不同,所需的试剂也应不同,所以RNA专用的转染试剂会更好一些。比如Entranster试剂. 2.RNA转染时RNA的用量 RNA转染的用量必须参考RNA转染试剂说明,因为RNA和 …
阅读更多 »Stem Cell Research & Therapy | 中国人民解放军总医院:如何改善肾间质纤维,防止肾衰老?
发表在《Stem Cell Research & Therapy 》期刊的“Regulation of connective tissue growth factor expression by miR-133b for thetreatment of renal interstitial fibrosis in aged mice …
阅读更多 »CNS neuroscience &therapeutics | 北京大学周长满教授团队报道:发现PDCD5在大脑出血中的新作用
周长满教授团队在《CNS neuroscience &therapeutics》期刊上发表的“The Involvement of Programmed Cell Death 5 (PDCD5) in the Regulation of Apoptosis in Cerebral Ischemia/Reperfusion Injury“文 …
阅读更多 »ECL发光液(enlight)与丹参酮ii-磺酸钠和BKca通道研究
丹参酮ii-磺酸钠(ds-201)是丹参酮ii-a的水溶性衍生物,可诱导血管舒张并激活BKca通道。为了探讨ds-201在BKca通道上的作用机制,现分享一篇ECL发光液(enlight)与丹参酮ii-磺酸钠和BKca通道研究的文献,以供参考。 文献地址:https://www.nature.com/articles/aps201485
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与膝关节骨性关节炎中WISP-1调控机制的研究
随着生活、工作方式的改变及社会人口的老龄化,骨关节退行性病变已成为高发疾病,其中代表性疾病之一为骨性关节炎(osteoarthritis, OA)。最近研究表明:WISP-1 具有促进关节软骨破坏的作用 。WISP-1 在正常软骨和滑膜中几乎不表达,而在退变的软骨及滑膜(如OA)中WISP-1异常增高,通过诱导MMPs及aggrecanas …
阅读更多 »病毒载体的基本元件
反转录病毒载体 最常用的反转录病毒载体基于Mo -MLV 。第一代载体所携带的转基因的两侧是2 个完整的LTR, 由增强子(U3) 、R 区(即转录起始区,在病毒颗粒中的载体基因组两端均存在)及U5 区构成。病毒载体的包装主要由包装信号序列(ψ)介导,而邻近的gag序列能够显著提高其包装效率。所有反转录病毒载体均携带一个ψ甲序列和部分gag 序列组成的扩展包 …
阅读更多 »体内转染与siRNA在病毒性心肌炎小鼠模型中的抗病毒作用研究
Coxsackie Virus属于小RNA 病毒科,肠道病毒(enteroviruses)属,是导致病毒性心肌炎的主要病毒之一,多发于儿童和青少年,可引起急性心力衰竭,部分可发展为扩张性心肌病,严重危害少年儿童健康,目前临床缺乏特异有效的药物。RNA干扰自1998 年《Science》杂志报道以来,已被广泛 …
阅读更多 »体内转染(entranster)与异甘草素和大鼠早期脑损伤研究
脑内出血(intracerebral hemorrhage,ich)可引起有效的氧化应激反应和炎症过程,异甘草素(isoliquiritigenin)是一种类黄酮物质,可以激活核因子e2相关因子2(nrf2)介导的抗氧化系统,负调控核因子b(nf-κbκκ)和nod受体家族。现分享一篇体内转染(entranster)与异甘草素和大鼠早期脑损伤研究的文献,以供 …
阅读更多 »DNA转染与Cep70与γ-微管蛋白和有丝分裂纺锤体组装研究
有丝分裂纺锤体的解除与基因组不稳定性有关,这是肿瘤发生和恶性转化的一个重要方面。为了保证染色体传递的准确性,有丝分裂纺锤体由精细的机制组装,并由动物细胞中的着丝粒组织配制。尤其是,中心体蛋白被认为协同作用以确保准确的纺锤体形成,但分子细节仍有待研究。现分享一篇DNA转染(Entranster)与Cep70与γ-微管蛋白相互作用在有丝分裂纺锤体组装中作用的研究 …
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