英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
干细胞是一类具有自我更新能力和多向分化潜能的原始细胞，包括胚胎干细胞、成体干细胞和诱导多能干细胞（IPS）。干细胞具有非常重要的理论研究意义和临床应用价值。利用胚胎干细胞建立多种细胞类型的体外分化系统，使人们能够在细胞和分子水平上研究哺乳动物的发育过程；不同发育阶段的细胞可确定胚胎发 …
阅读更多 »siRNA转染效率不理想怎么办？
siRNA转染效率不理想，常见的原因有： 1. RNA与转染试剂比例不佳 由于RNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记，决定了RNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件，建议先进行预实验优化。 2. 细胞密度不佳 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调，但未成功转染的细胞却不受影响，这时转染效率 …
阅读更多 »细胞电转染实验注意事项
选择合适的电场强度 合适的电场强度对于电转染实验非常重要，电场强度不能过高，过高会增加细胞的死亡率；也不能过低，过低不能增加膜的通透性或在膜上形成小孔。不同细胞系具有不同的最佳场强值，实验前应测定所转染细胞系的最佳电场强度。 细胞的选择 用于电转的细胞一般选取处于对数生长期的细胞（15代以内，传代后2d）。因为处于对数生长期的细胞分裂旺盛，表面结构致密比稳定 …
阅读更多 »ECL发光液（enlight）与槲皮素对更年期大鼠卵巢抗氧化能力影响的研究
绝经是女性衰老的重要标志，卵巢是对衰老最敏感的器官。槲皮素是一种潜在的抗氧化剂和自由基清除剂，广泛存在于水果、蔬菜和树叶中。然而槲皮素对卵巢衰老的作用尚不清楚，其抗氧化作用机制尚不清楚。现分享一篇ECL发光液（enlight）与槲皮素对更年期大鼠卵巢抗氧化能力影响的研究的文献，以供参考。
阅读更多 »Cell Death & Disease | 西北农林科技大学报道：如何有效增肌?
该团队在《Cell Death & Disease》期刊上发表了题为“CircRILPL1 promotes muscle proliferation and differentiation via binding miR-145 to activate IGF1R/PI3K/AKT pathway”的论文。研究人员利用体内转染试剂（En …
阅读更多 »体内转染（Entranster）与糖尿病神经痛大鼠脊髓CGRP释放研究
糖尿病是一种以慢性高血糖为特征的代谢性疾病。2013，全球糖尿病患者超过3亿8200万人，预计到2035年底人数将达到5亿9200万人。糖尿病患者经常会出现并发症，例如心血管疾病、视网膜病变、神经病变等。糖尿病神经病理性疼痛（DNP）是糖尿病神经病变的主要临床症状之一，常表现在远端肢 …
阅读更多 »siRNA转染（Entranster）与细胞骨架蛋白和肝肺综合征研究
肝肺综合征（HPS）是肝病，肺内血管扩张（IPVD）和低氧血症的三联征，动脉低氧血症可引起肺血管重构（PVR）。在最近的研究中，与HPS有关的PVR中肺动脉平滑肌细胞增殖中的作用已确定；细胞骨架蛋白的变化在细胞增殖中起着重要的作用。但与HPS有关的PVR中细胞骨架蛋白表达与分子机制相关性知之甚少。现分享一篇siRNA转染（Entranster- …
阅读更多 »病毒载体的基本元件
反转录病毒载体 最常用的反转录病毒载体基于Mo -MLV 。第一代载体所携带的转基因的两侧是2 个完整的LTR, 由增强子(U3) 、R 区（即转录起始区，在病毒颗粒中的载体基因组两端均存在）及U5 区构成。病毒载体的包装主要由包装信号序列（ψ）介导，而邻近的gag序列能够显著提高其包装效率。所有反转录病毒载体均携带一个ψ甲序列和部分gag 序列组成的扩展包 …
阅读更多 »电转染实验时，siRNA有什么要求？
使用Entranster-E试剂进行电转染实验时，要求使用纯度高、无菌且序列正确的siRNA。确定电转染的最佳siRNA浓度。尝试在250-750nM最终浓度范围内的siRNA浓度。Engreen建议导入一个非靶向或无意义的siRNA控制序列，以验证siRNA的基因特异性。此外，针对具有多个siRNA序列的基因可确保产生的表型不是由于脱靶效应所致 …
阅读更多 »体内转染（Entranster）与小鼠基因表达光调控研究
小干扰RNA（siRNA）在基因功能研究和药物开发方面扮演着重要的角色。最近，通过化学修饰作用设计出对光不稳定的siRNA，从时间和空间上来阐明基因额沉默过程。现分享一篇体内转染（Entranster）与小鼠基因表达光调控研究的文献，以供参考。
阅读更多 »