英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
TAR DNA结合蛋白-43（TDP-43）是一种多功能的DNA和RNA结合蛋白，参与RNA转录、选择性剪接，并可调节细胞中mRNA的稳定性。TDP-43已被证明是患有肌萎缩侧索硬化症（ALS）和额颞叶变性（FTLD）患者中神经元和胶质细胞包涵体病理学培养基的关键组分。最近的报告表明，TDP-43蛋白是一种 …
阅读更多 »体内转染与黄体酮减轻实验性APS小鼠胎盘损伤研究
APS是一种全身性自身免疫性疾病，在持续存在APL的情况下，可引起妊娠疾病和反复的全身血管血栓形成，累及动脉和静脉血管。APL是一系列异质性磷脂结合体。临床相关APL包括狼疮抗凝剂（LA）、抗心磷脂（ACL）和抗β2GPI。APL与β2GPI之间的抗原反应过程是APS发病机制中的关键环节。但APL介导的流产和组织损伤的具体机制尚未得到充分研究。 …
阅读更多 »提高慢病毒感染细胞效率的方法
可使用病毒感染增强剂envirus提高病毒的感染效率，下面以慢病毒为例，说一下实验过程。 1.提前一天细胞铺板 提前一天将细胞种植在24孔板中，以感染时细胞融合度在50%左右为宜(悬浮细胞根据需要调整，不要采用过高的细胞密度)。 2.感染 ⑴将2ul的Envirus-LV用25μl无血清稀释液稀释，充分混匀，制成Envirus-LV稀释液。4℃静置5分钟。 …
阅读更多 »RNA转染与髓源性抑制细胞的抑制潜能研究
髓系来源的抑制性细胞（MDSC）介导了广泛而深刻的免疫抑制，特别是对T细胞功能的影响。在小鼠中，MDSC的特征是细胞表面分子Gr1(包括巨噬细胞和中性粒细胞标志物Ly6C和Ly6G)和CD11b的表达；在人类中，MDSC通常是CD11b+CD33+HLA-DR2。小鼠CD11b+Gr1+细胞群由两个亚群组 …
阅读更多 »动物体内转染试剂entranster-invivo的主要特点
●最快3天可以得到结果，核酸+转染试剂，注射动物，完成转染。 ● 肝、肾、心、肺，血液系统，神经系统，生殖系统，皮肤…成功应用。 ● 可方便、快捷更换不同的小片断RNA进行动物试验。 ● 方法先进，抛弃病毒，众多实验室应用，稳定可靠。 ● 比使用病毒节省90%以上费用，时间缩短到3天！
阅读更多 »病毒感染细胞实验整体流程
目的基因不能直接整合到大多数真核细胞，常用的手段是将目的基因包装成病毒来感染细胞，从而得到表达满足实验需求。病毒有很多种，常见的有慢病毒和腺病毒。关于慢病毒和腺病毒的原理以及特别前面的文章中都有介绍过，可以搜索关键字查看。今天主要介绍病毒感染细胞的实验流程。 1.构建目的基因到载体 构建手段 一般是根据原始质粒信息确定克隆方案，有以下两种手段。 1）如果原始 …
阅读更多 »体内转染与一氧化碳对心脏骤停后改善神经功能作用研究
功能失调的线粒体与心脏骤停（CA）后的神经损伤有关。尽管一氧化碳（CO）在临床前组织损伤模型中显示出各种潜在的治疗作用，但其在CA中的作用机制仍不清楚。现分享一篇体内转染（engreen）与一氧化碳在老年大鼠心脏骤停后改善神经功能的新作用研究的文献，文献旨在研究一种新的一氧化碳放分子对CA术后大脑线粒体功能障碍和神经损伤的影响。 文献地址：htt …
阅读更多 »RNA转染影响因素
转染试剂 转染中要额外注意的就是转染试剂应该是确认无RNase污染的，而且也尽量避免和质粒DNA转染混用——即使试剂本身兼容DNA和RNA转染，因RNA与DNA大小不同，转染条件不同，所需的试剂也应不同，所以RNA专用的转染试剂会更好一些。比如Entranster-R4000. RNA转染时RNA的用量 RNA转染的用量必须参考RNA转染试剂说明，因为RNA …
阅读更多 »基因敲除实验和动物体内转染实验（entranster-invivo）对比
基因敲除动物 Entranster-in vivo 技术方法 同源重组等方法获得基因敲除动物，然后进行实验 直接将核酸与转染试剂混合，注射到动物体内 单次实验周期 10～20个月 3天 稳定性 一般 …
阅读更多 »体内转染（entranster）与脂多糖诱导的急性肺损伤研究
急性肺损伤（Acute Lung Injury，ALI）及其严重形式，即急性呼吸窘迫综合征（ARDS），是由肺炎、败血症、外伤和/或吸入引起的肺部炎症性疾病。急性肺损伤和急性呼吸窘迫综合征导致重症监护病房的发病率和死亡率显著升高。尽管机械通气和支持性护理的进展提高了急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征患者的生存 …
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