英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
试剂 运载 DNA l0mg/mL 细胞生长培养基 电穿孔缓冲液 指数生长的培养细胞 线性化或环状质粒DNA ( 1 ~ 5μg/μL , 溶于无菌去离子水） 磷酸盐缓冲液( PBS ) 胰岛素 设备 电穿孔杯 电穿孔仪器 血细胞计数器 组织培养皿或多孔培养板 组织培养瓶（75cm2） 方法 准备电穿孔用细胞。 对于贴壁细胞 电穿孔前一天，通过胰酶消化释放贴 …
阅读更多 »体内DNA转染（Entranster）与实验性脑出血大鼠继发性脑损伤神经保护作用研究
脑内出血（Intracerebral hemorrhage，ICH）是一种常见的致命型的，具有高发病率和死亡率的中风，这往往会导致长期的神经功能障碍。除了通过直接机械损伤引起的出血性原发性脑损伤，脑出血还会导致继发性脑损伤（SBI），这已被证明会导致神经功能恶化。现分享一篇体内DNA转染（Entranster）与实验性脑出血大鼠继发性脑损伤神经保护作用研究的 …
阅读更多 »质粒DNA转染注意事项
1.启动子的选择启动子的选择对于转染基因的有效表达是非常重要的。对于转染过程本身虽然无甚影响，但是对转染结果却有着微妙的影响。2.质粒的大小和质量线性化还是超螺旋会影响转染结果：超螺旋质粒的转染效率比线性DNA高得多，特别是瞬时转染。而线性化DNA转染的整合几率高。质粒太大了转染会困难一些。毕竟，相对致密、较小的外源异物被细胞内吞的几率要大一些。如果你的质粒 …
阅读更多 »细胞DNA转染实验影响因素
1.细胞密度 一般来说，当细胞密度达到60%～80%时进行转染可以取得较高的转染效率，过低或过高都会影响转染效果。 2.细胞状态 这点非常关键，很多时候传代次数太少或者太多都将导致细胞对转染试剂敏感度的改变。因此，为了提高转染效率以及转染稳定性、降低细胞毒性，应尽量使用适度传代的细胞系，并在不同次实验时保持细胞传代次数的一致性。 还有，尽量选择无 …
阅读更多 »DNA转染（Entranster）与ZNF121和乳腺上皮细胞的靶基因调控研究
新型锌指蛋白121（ZNF121）已被证明在物理和功能上与MYC癌蛋白相关联，以调节细胞增殖和可能的乳腺癌发展。为了进一步了解ZnF121在细胞增殖和癌变过程中的作用，现分享一篇DNA转染（Entranster）与ZNF121和乳腺上皮细胞的靶基因调控研究的文献，以供参考。
阅读更多 »DNA转染与核受体Nur77和脂肪酸氧化及黑色素瘤细胞研究
脂肪酸氧化（FAO）是细胞获得ATP和NADPH来克服代谢应激的关键。然而，脂肪酸氧化（FAO）在肿瘤中调节的机制仍不清楚。现分享一篇DNA转染（Entranster）与核受体Nur77和脂肪酸氧化及黑色素瘤细胞研究的文献，以供参考。
阅读更多 »DNA转染（Entranster）与抗病毒天然免疫研究
天然免疫是保护宿主细胞免受微生物感染的第一道屏障。TANK结合激酶1（TBK1）介导的I型干扰素（IFN）诱导在宿主抗病毒反应及免疫平衡方面起着至关重要的作用。现分享一篇运用DNA转染（Entranster-H4000）研究抗病毒天然免疫的文献，以供参考。
阅读更多 »DNA转染（Entranster）与线粒体介导的先天性免疫反应研究
宿主细胞的模式识别受体可以检测到微生物感染进而诱导先天免疫反应以激活宿主防御系统对抗入侵微生物，现分享一篇DNA转染（Entranster-H4000）与线粒体介导的先天性免疫反应研究的文献，指出果蝇zeste基因增强子同源物2（EZH2）是抗病毒天然免疫反应的负调节因子和抗病毒药物的新靶点。
阅读更多 »DNA转染与5-羟色胺和非酒精性脂肪性肝病研究
非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是世界范围内最常见的肝脏疾病之一，它由单纯性脂肪变性发展为炎性非酒精性脂肪性肝炎(NASH)，在某些情况下甚至发展为肝硬化或肝细胞癌。NAFLD与2型糖尿病（T2DM）相关。在NAFLD中，肝脏发生过量脂质合成（ELS），主要包括新的脂肪生成和三酰甘油（TG）以及极低密度脂 …
阅读更多 »DNA转染效率低的可能的原因有哪些？
1.准备不足 做细胞转染的时候，在开展正式实验前要多做预试验，优化转染条件。优化转染条件包括：转染试剂的用量、DNA密度、细胞密度、试剂和DNA混合孵育时间等等。 2.细胞污染 细胞污染也是造成细胞死亡，转染效率低下的一大原因。首先，转染细胞用的质粒必须保证无菌。而现在市场上的一般的质粒提取试剂盒都做不到绝对无菌。分享一个小秘诀：将提完质粒后或者提的最后一步 …
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