英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
1.启动子的选择启动子的选择对于转染基因的有效表达是非常重要的。对于转染过程本身虽然无甚影响，但是对转染结果却有着微妙的影响。2.质粒的大小和质量线性化还是超螺旋会影响转染结果：超螺旋质粒的转染效率比线性DNA高得多，特别是瞬时转染。而线性化DNA转染的整合几率高。质粒太大了转染会困难一些。毕竟，相对致密、较小的外源异物被细胞内吞的几率要大一些。如果你的质粒 …
阅读更多 »DNA转染效率低的可能的原因有哪些？
1.准备不足 做细胞转染的时候，在开展正式实验前要多做预试验，优化转染条件。优化转染条件包括：转染试剂的用量、DNA密度、细胞密度、试剂和DNA混合孵育时间等等。 2.细胞污染 细胞污染也是造成细胞死亡，转染效率低下的一大原因。首先，转染细胞用的质粒必须保证无菌。而现在市场上的一般的质粒提取试剂盒都做不到绝对无菌。分享一个小秘诀：将提完质粒后或者提的最后一步 …
阅读更多 »RNA转染实验的影响因素
1. 转染试剂 转染中要额外注意的就是转染试剂应该是确认无RNase污染的，而且也尽量避免和质粒DNA转染混用——即使试剂本身兼容DNA和RNA转染，因RNA与DNA大小不同，转染条件不同，所需的试剂也应不同，所以RNA专用的转染试剂会更好一些。比如Entranster试剂. 2. &n …
阅读更多 »细胞DNA转染效率低的原因
DNA转染效率低的原因可从以下几方面找： 1.质粒DNA或混和液中含有血清。 对策：用无血清培养基或Opti-MEM培养基。 2.质粒DNA和转染试剂的比率不是最优 对策：对大多数细胞而言，质粒DNA和转染试剂的比例为1:2-1:3，一般要做优化实验，比例从1:0.5-1:5 逐一检测。 3.质粒DNA 已部分降解或质量不够好 对策：用好的质粒纯化试剂确保质 …
阅读更多 »体内DNA转染（Entranster）与实验性脑出血大鼠继发性脑损伤神经保护作用研究
脑内出血（Intracerebral hemorrhage，ICH）是一种常见的致命型的，具有高发病率和死亡率的中风，这往往会导致长期的神经功能障碍。除了通过直接机械损伤引起的出血性原发性脑损伤，脑出血还会导致继发性脑损伤（SBI），这已被证明会导致神经功能恶化。现分享一篇体内DNA转染（Entranster）与实验性脑出血大鼠继发性脑损伤神经保护作用研究的 …
阅读更多 »DNA转染与Cep70与γ-微管蛋白和有丝分裂纺锤体组装研究
有丝分裂纺锤体的解除与基因组不稳定性有关，这是肿瘤发生和恶性转化的一个重要方面。为了保证染色体传递的准确性，有丝分裂纺锤体由精细的机制组装，并由动物细胞中的着丝粒组织配制。尤其是，中心体蛋白被认为协同作用以确保准确的纺锤体形成，但分子细节仍有待研究。现分享一篇DNA转染（Entranster）与Cep70与γ-微管蛋白相互作用在有丝分裂纺锤体组装中作用的研究 …
阅读更多 »DNA转染与中国冠鸭冠垫胚胎形态观察及hoxc8基因表达研究
中国冠鸭（凤头鸭）最近又出现在中国。除了白色的羽毛和黑色的嘴和脚之外，凤头鸭还有很高的羽毛冠。该品种可用于观赏或作为模式生物；然而，对其独特形态特征的遗传基础和发育知之甚少。现分享一篇DNA转染（entranster）与中国冠鸭冠垫胚胎形态观察及hoxc8基因表达研究的文献，以供参考 …
阅读更多 »DNA转染（Entranster）与鞘磷脂合成酶2和H2O2诱导的内皮功能障碍研究
动脉粥样硬化（AS）是各种心脑血管疾病的主要病因，发病率和死亡率都很高。氧化应激诱导内皮细胞功能障碍是动脉粥样硬化的病理基础。此外，鞘磷脂和Wnt/β-连环素信号通路被认为与AS密切相关，但具体机制尚不清楚。 现分享一篇DNA转染（Entranster）与鞘磷脂合成酶2和H2O2诱导的内皮功能障碍研究的文献，以供参考。
阅读更多 »DNA转染（Entranster）与HIV-1 TAT泛素化和羧基末端区的稳定性和活性调控研究
人类免疫缺陷病毒1型（HIV-1）的反转录激活因子（TAT）蛋白已知经历泛素化。然而，泛素化在调节TAT稳定性和活性方面的作用尚不清楚。 现分享一篇DNA转染（Entranster）与HIV-1 TAT泛素化和羧基末端区的稳定性和活性调控研究的文献，以供参考。
阅读更多 »DNA转染与干细胞自我更新和多能性维持的研究
干细胞是一类具有自我更新能力和多向分化潜能的原始细胞，包括胚胎干细胞、成体干细胞和诱导多能干细胞（IPS）。干细胞具有非常重要的理论研究意义和临床应用价值。利用胚胎干细胞建立多种细胞类型的体外分化系统，使人们能够在细胞和分子水平上研究哺乳动物的发育过程；不同发育阶段的细胞可确定胚胎发育和细胞分化的分子机制 …
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