瓜蒌提取物具有多种药用功能。最近,有报道称从瓜蒌中分离的一种丝氨酸蛋白酶TKP可以通过诱导细胞凋亡从而抑制人结直肠癌细胞的增殖。现分享一篇DNA转染(Entranster)与人结直肠癌细胞通路研究的文献,文献中研究了TKP对于大肠腺癌细胞上皮间质转化(EMT)的影响。
阅读更多 »细胞DNA转染实验步骤
下面以Entranster-H4000,DNA转染试剂为例,简要说明DNA细胞转染实验步骤 1.提前一天细胞铺板 提前一天将细胞种植在24孔板中,以转染时细胞密度在60%左右为宜。 2.转染过程 ⑴将0.8μg的DNA用25μl无血清稀释液稀释,充分混匀,制成DNA稀释液。 注意:无血清稀释液建议采用OPTI-MEM、无血清DMEM或1640。 ⑵将2μl的 …
阅读更多 »DNA转染(Entranster)与多梳抑制复合物2(PRC2)和肿瘤研究
多梳抑制复合物2(PRC2),可对H3K27三甲基化(H3K27me3),是肿瘤发生发展的一部分,和/或维持成人组织特异性。PRC2癌症中的关键作用使它成为表观遗传学癌症治疗的治疗靶点。现分享一篇DNA转染(Entranster-H4000)与多梳抑制复合物2(PRC2)和肿瘤研究的文献,以供参考。 文献地址:https://www.engre …
阅读更多 »DNA转染(Entranster)与病理性色素沉着研究
皮肤色素沉着是通过黑色素细胞中黑色素的合成而形?的。黑素细胞是一种上皮细胞,主要位于表皮的基底细胞层,少数黑素细胞位于粘膜。由黑色素组成的色素颗粒可以分布和运输到邻近的角质形成细胞。黑皮质素-1受体(MC1R)的突变是人类皮肤晒黑和色素沉着的关键。现分享一篇DNA转染(Entranster)与病理性色素沉着研究的文献,以供参考。
阅读更多 »DNA转染(Entranster)与HIV-1 TAT泛素化和羧基末端区的稳定性和活性调控研究
人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)的反转录激活因子(TAT)蛋白已知经历泛素化。然而,泛素化在调节TAT稳定性和活性方面的作用尚不清楚。 现分享一篇DNA转染(Entranster)与HIV-1 TAT泛素化和羧基末端区的稳定性和活性调控研究的文献,以供参考。
阅读更多 »如何得到更高的DNA细胞转染效率?
我认为,要想更高的细胞DNA转染效率,应注意以下几点: 1, 质粒的大小和质量 线性化还是超螺旋会影响转染结果:超螺旋质粒的转染效率比线性DNA高得多,特别是瞬时转染。而线性化DNA转染的整合几率高。质粒太大了转染会困难一些。毕竟,相对致密、较小的外源异物被细胞内吞的几率要大一些。如果你的质粒正好比较大,又没有经验,选择特别注明可以转大质粒的转染试剂成功几率 …
阅读更多 »DNA转染与RAB31沉默对骨肉瘤细胞增殖和迁徙影响研究
骨肉瘤(Osteosarcoma,OS)是人类原发性恶性骨肿瘤中最常见的一种类型,具有远距离侵袭和局部侵袭的潜在倾向。OS主要见于青少年儿童,首次发病多为15-19岁。骨肉瘤是一种侵袭性恶性肿瘤,起源于间充质(因而是肉瘤)的原始转化细胞,表现为成骨细胞分化和产生恶性骨样。现分享一篇DNA转染(entranster)与RAB31沉默对骨肉瘤细胞 …
阅读更多 »细胞DNA转染效率低的原因
DNA转染效率低的原因可从以下几方面找: 1.质粒DNA或混和液中含有血清。 对策:用无血清培养基或Opti-MEM培养基。 2.质粒DNA和转染试剂的比率不是最优 对策:对大多数细胞而言,质粒DNA和转染试剂的比例为1:2-1:3,一般要做优化实验,比例从1:0.5-1:5 逐一检测。 3.质粒DNA 已部分降解或质量不够好 对策:用好的质粒纯化试剂确保质 …
阅读更多 »DNA转染效率低的可能的原因有哪些?
1.准备不足 做细胞转染的时候,在开展正式实验前要多做预试验,优化转染条件。优化转染条件包括:转染试剂的用量、DNA密度、细胞密度、试剂和DNA混合孵育时间等等。 2.细胞污染 细胞污染也是造成细胞死亡,转染效率低下的一大原因。首先,转染细胞用的质粒必须保证无菌。而现在市场上的一般的质粒提取试剂盒都做不到绝对无菌。分享一个小秘诀:将提完质粒后或者提的最后一步 …
阅读更多 »DNA转染与Cep70与γ-微管蛋白和有丝分裂纺锤体组装研究
有丝分裂纺锤体的解除与基因组不稳定性有关,这是肿瘤发生和恶性转化的一个重要方面。为了保证染色体传递的准确性,有丝分裂纺锤体由精细的机制组装,并由动物细胞中的着丝粒组织配制。尤其是,中心体蛋白被认为协同作用以确保准确的纺锤体形成,但分子细节仍有待研究。现分享一篇DNA转染(Entranster)与Cep70与γ-微管蛋白相互作用在有丝分裂纺锤体组装中作用的研究 …
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