细胞培养

此种方法最为可靠且成本低廉， 但培养周期较长。常用于细胞及临床治疗细胞的支原体检查。 （一）材料与设备 1. 精氨酸肉汤培养基   按说明称量粉剂，蒸馆水配制， 高压除菌（加20％胎牛血清）。2. 支原体琼脂培养基   按说明称量粉剂，蒸馆水配制，高压除菌（加20％胎牛血清）。3. 其他   超净工作台、无菌吸管、试管架、培养试管／皿、37°C 培养箱。 （ …

1.从细胞单层吸出培养基。2. 缓慢加入37’C 温浴的PBS 或不含血清的培养基，让培养基沿容器壁流下，注意不要滴在细胞上，以免冲掉附着不牢的细胞。3. 再吸出PBS 或培养基。4. 加入含0.25 ％胰蛋白酶的PBS, 加入蜇以刚刚没过细胞为宜。5. 立即吸去胰蛋白酶，停留在细胞上的时间为10 ~ 30s(可以用不含血清的旧培养基多洗细胞几次 …

随着各型肝炎、肝硬化、肝癌等慢性肝病的发病率日益升高，体外培养的肝细胞也被广泛地用千肝病基础研究中。尽管细胞培养技术不断改进和成熟，国内外也先后建立了多株人肝癌细胞系，但体外分离和培养人正常肝细胞仍是非常有价值的研究材料。 （一）材料与设备 1. 设备与器材   超净工作台、离心机、CO2 培养箱、－70℃ 冰箱、－20℃冰箱。2. 无菌材料   大培养皿、 …

划痕实验是一种简单易行的检测肿瘤细胞运动的方法， 实验成本低， 可以用来检测贴壁生长肿瘤细胞的侵袭转移能力。 （一）材料与设备 6 孔板或者培养皿， 10 μl 或者200μl 无菌的枪头， Marker 笔，直尺。 （ 二）操作步骤 1. 先用Marker 笔在6 孔板背后，用直尺比着，均匀地划横线，每隔0.5-1cm一道，横穿过孔。每孔至少穿过5 条线。 …

  alkphos 碱性磷酸酶 amp 氨苄青霉素 AMVRT 鸟类粒细胞病毒反转录酶 ANOVA 方差分析 BAC 细菌人工染色体 β-gal  β－半乳糖苷酶 Bis  N, N’－亚甲双丙烯酰胺 bp 碱基对 BPB 溴酚蓝 BSA 牛血清白蛋白 CAT 氯霉素乙酰转移酶 cDNA 互补DNA cfu 菌落形成单位 CMC 临界微囊浓度 C …

细胞生长时的表型会发生改变或漂变，所以细胞必须计数，计数后应马上冻存。 冷冻细胞前 检查冷冻细胞所需试剂和器具是否备齐。 确认有无菌的可用于冷冻的冻存管 。 确认液氮罐里是否有冻存细胞的位置。 冷冻细胞 将培养基中的细胞培养至对数生长期。 进行活细胞计数，不要冻存死细胞比例高达20％以上的细胞。 决定冻存量，安排需要几个冻存管。 冻存细胞在融化时要稀释10 …

荧光表达后的细胞可以在冻存后72小时再测荧光，但有几点需要注意： 细胞存活率：冻存和解冻过程可能会影响细胞的存活率和状态。确保细胞在解冻后恢复良好，具有正常的形态和活力。 荧光稳定性：荧光蛋白的稳定性可能会随时间或细胞状态的变化而有所改变。确保荧光信号在解冻后仍然足够强且稳定。 冻存条件：使用适当的冻存保护剂（如DMSO）并在-80°C或液氮中冻存，以尽量减 …

EB 病毒的特性之一是能使人外周血B 淋巴细胞转化，使其成为连续分裂，永久生存的类淋巴母细胞样细胞，即永生化细胞。每一永生细胞株都保存了原来提供血样个体的完整基因组，为研究世界上不同人种、不同民族的遗传结构，不同个体、不同人群对疾病的易感性，特别是对家族性遗传疾病和地方性疾病的易感性，提供了宝贵的遗传资源。 （一）材料与设备 1. 无菌材料   细胞培养瓶T …

开始培养细胞后，就恨不得写好每一天的进度计划，甚至连出成果那天的日期都预估好，然而，生活总是充满了意外…… 我的细胞，你为啥长的这么慢呢？？究其原因，真是丰富多彩…… 如果整个实验室只有你一个人遇到这个问题…… 1. 检査你所培养的细胞是否存在污染。 (a)如果培养细胞未添加抗生素（必须添加！），细胞污染则是不可避免的。 (b) 检测可能污染的途径和原因（无 …

随着细胞培养技术的不断改进，虽然正常细胞难于培养成活，科研人员还是不断研究各种正常细胞的培养方法。到目前为止，几乎体内各种组织细胞均可在体外成功培养。越来越多的研究工作可应用体外培养的正常细胞作为模型开展工作。神经胶质细胞的成功培养最早由Raff 等完成。视神经胶质细胞的培养开始于1990 年，先后有多个实验室培养成功。视神经胶质细胞参与眼部多种疾病的发生、 …