细胞转染实验的方法有以下几种: 1. 电穿孔法。通过短暂的高电场电脉冲处理细胞,沿细胞膜的电压差异会导致细胞膜的暂时穿孔。DN被认为是穿过孔扩散到细胞内的。电脉冲和场强的优化对于成功的转染非常重要,因为过高的场强和过长的电脉冲时间会不可逆地伤害细胞膜而裂解细胞。理论上说电穿孔法可用于各种细胞,且不需要另外采购特殊试剂,但需要昂贵的电转仪。此法每次转染需要更多 …
阅读更多 »RNA转染实验效率低是什么原因
RNA转染效率低,可能的原因: 1. 转染试剂不适合。建议选择RNA专用转染试剂,如Entranster。 2. 转染试剂和RNA的量不够,或者比例不对。优化实验条件,调整试剂和RNA用量,优化二者比例。 3.检测时间有问题。适当调整检测时间。 4. RNA质量问题。选择纯度高的RNA。 5. 细胞状态不佳。调整细胞状态,调整细胞融合度。
阅读更多 »单克隆细胞培养上清的大规模制备
材料(其他材料见单克隆细胞培养上清的制备) 含有5~10mmol /L HEPES 的DMEM 完全培养基和DMEM- 10 完全培养基,pH 为7.2~7. 4 70% (V/ V) 乙醇 FBS 10% (m/V) 叠氮钠,可选的 850cm2 滚筒式培养瓶和滚简装置,37°C 250ml 塑料锥底离心管,无菌 离心机转子 0. 45μm 过滤装置,可选 …
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