其它

CCK8试剂盒，是用于测定细胞增殖或毒性实验中活细胞数目的一种高灵敏度，无放射性的比色检测法。CCK法应用非常广泛，如药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验以及生物因子的活性检测等。下面以engreen的CCK8试剂盒为例，简要说明细胞增殖-毒性检测的操作步骤 方法/步骤 在96孔板中配制100μl的细胞悬液。将培养板在培养箱预培养 24 小时 …

SDS-PAGE凝胶制备属于实验室最常规的操作了，刚开始做蛋白实验总是在找凝胶配制实验中所用试剂的配方，这里总结了分离胶、浓缩胶、分离胶和浓缩胶缓冲液、考马斯亮蓝染液、样品缓冲液、电泳缓冲液等配方。 1. 分离胶(12%) 配制 所需试剂 所需体积 分离胶(12％) 30％丙烯酰胺 6.0 ml 1.5 mol/l Tris-HCl 3.8 ml 10%SD …

1，  质粒的大小和质量 线性化还是超螺旋会影响转染结果：超螺旋质粒的转染效率比线性DNA高得多，特别是瞬时转染。而线性化DNA转染的整合几率高。质粒太大了转染会困难一些。毕竟，相对致密、较小的外源异物被细胞内吞的几率要大一些。如果你的质粒正好比较大，又没有经验，选择特别注明可以转大质粒的转染试剂成功几率会高一些。有的转染试剂还会提供一些 …

    我做了很久的WB，最大的一个难点感觉在于样品制备上！蛋白的降解有些时候是你想象不到的，可能出奇的糟糕，也可能完全没事~~如果单独做WB的话，感觉以“快速彻底裂解，先变性后保存”的原则比较有效，尽量选择足够强的裂解液，甚至直接给loading buffer裂解，然后取出部分蛋白定量，其余加入loading buffer100度充分变 …

        CCK8 在0-5℃下能够保存至少6 个月，在-20℃下避光可以保存1 年。如果需要长期保存，我们推荐-20℃的储藏条件。 如需了解更多关于cck8产品的信息，请点击https://www.engreen.com.cn/cck-8-kit

细胞生物学的战友，应该对细胞转染不陌生，没做过也见别人做过。有个问题想跟大家讨论一下，就是脂质体毒性的问题。我们都知道做一次细胞转染不容易，从准备细胞到目的细胞筛选，过程相当繁琐。所以如何提高转染效率成为了关键，但是常用的脂质体转染要求无血清转染，而且有很大的细胞毒性，对转染效率和实验结果都会产生影响，那为什么脂质体转染试剂毒性这么大？ 已有众多的文献报道， …

western-blot实验成功的条件 1.        样品质量。所抽取样品的蛋白含量，蛋白变性是否充分等等，还有，蛋白样品的PH值是否在7~8之间。这会直接影响到样品浓缩的效果。此外，蛋白样品是否降解、目的蛋白是否已抽取充分都会对最终结果的可靠性有影响。 2.        …

RNA转染效率低，可能的原因： · 转染试剂不适合。建议选择RNA专用转染试剂，如Entranster试剂。 · 转染试剂和RNA的量不够，或者比例不对。优化实验条件，调整试剂和RNA用量，优化二者比例。 · 检测时间有问题。适当调整检测时间。 · RNA质量问题。选择纯度高的RNA。 · 细胞状态不佳。调整细胞状态，调整细胞融合度。

1.细胞密度 　　一般来说，当细胞密度达到60%～80%时进行转染可以取得较高的转染效率，过低或过高都会影响转染效果。 2.细胞状态 　　这点非常关键，很多时候传代次数太少或者太多都将导致细胞对转染试剂敏感度的改变。因此，为了提高转染效率以及转染稳定性、降低细胞毒性，应尽量使用适度传代的细胞系，并在不同次实验时保持细胞传代次数的一致性。 　　还有，尽量选择无 …

       甲状腺癌（TC）是全球最常见的内分泌恶性肿瘤，约占头颈部恶性肿瘤的三分之一。近几十年来，全球甲状腺癌发病率和死亡率不断上升，有大量的危险因素与TC的发生和发展密切相关，如遗传因素、环境暴露和表观遗传改变等。尽管在检测和手术管理方面有所改进，包括手术切除、放射治疗和左甲状腺素治疗，但仍有更多的最佳疗法有待进一步发展。因此，揭示TC进展的潜在机制和 …