做Western Blot发光实验经常有“背景太高”问题的出现,要弄清楚“背景太高”的原因,先要知道“背景”是什么,“背景”也是发光,影响发光的因素就会影响背景。 影响发光的因素主要有:1.含HRP的抗体;2.发光试剂;3.和发光试剂反应的杂质,如含杂质的膜。这里面,在很短时间内曝 …
阅读更多 »哪些物质会影响CCK8的测定?
当有还原性物质存在时会影响CCK8 的测定,例如含有维生素C的Glucose 等 (一般培养基中的量不多,酚红或血清不影响测定)。在有酚红存在的情况下,会增加空白吸收,但不影响测定,扣除空白吸收即可。 如需了解更多关于CCK8产品的信息,请点击https://www.engreen.com.cn/cck-8-kit
阅读更多 »体内转染(Entranster)与PTEN和冠状动脉微栓塞炎性反应研究
越来越多的证据表明,PTEN参与了不同病理条件下的炎症调节。但是,PTEN与猪冠状动脉微栓塞(CME)后心脏功能的损害的关系尚不清楚。现分享一篇体内转染(Entranster)与PTEN和冠状动脉微栓塞炎性反应研究的文献,以供参考。
阅读更多 »DNA转染效率影响因素
1, 质粒的大小和质量 线性化还是超螺旋会影响转染结果:超螺旋质粒的转染效率比线性DNA高得多,特别是瞬时转染。而线性化DNA转染的整合几率高。质粒太大了转染会困难一些。毕竟,相对致密、较小的外源异物被细胞内吞的几率要大一些。如果你的质粒正好比较大,又没有经验,选择特别注明可以转大质粒的转染试剂成功几率会高一些。有的转染试剂还会提供一些 …
阅读更多 »实验Figure的制作中需要注意哪几点?
统计图(Figure)是用图形将统计资料形象化,利用线条高低、面积大小代表数量,通俗易懂,比文本与统计表更便于理解和比较。 在科技论文中,应根据资料的类型及表达目的选用合适的统计图。例如,对不同性质分组资料进行对比时可选用直条图,说明事物各组成部分的构成情况可用圆形图或百分直条图,用于表达连续性资料频数分布可用直方图,为表明一事物随另一事物而变化的情况选用线 …
阅读更多 »细胞重组编程,比干细胞更牛
人体的很多疾病都是由于身体内某种特定的细胞损伤造成的。如果能直接用健康的细胞把受损的细胞替换掉并继续完成之前的工作,很有可能病就这样轻松治愈了。 事实上,说起来容易做起来难,不过科学家们还是在寻找一种方法,能把一种健康的细胞重新编程,转变成为患者需要的那种细胞,用于替换受损细胞。 这一过程被称作直接重编程(direct reprogramming),让“重塑 …
阅读更多 »影响western-blot实验的因素
1. 样品质量。所抽取样品的蛋白含量,蛋白变性是否充分等等,还有,蛋白样品的PH值是否在7~8之间。这会直接影响到样品浓缩的效果。此外,蛋白样品是否降解、目的蛋白是否已抽取充分都会对最终结果的可靠性有影响。 2. 凝胶质量。不连续SDS-PAGE胶对凝胶的要求 …
阅读更多 »如何提高qPCR反应的灵敏度与特异性?
首先确定模板RNA完整性好,无DNA污染。 RNA模板中不应含有扩增反应抑制剂。 为了防止模板降解,在反应体系中加入RNase抑制剂RNasin。 使用适量的模板RNA,模板量太多会降低特异性,太少会导致扩增不出条带或条带太弱。 若模板中有二级结构,可通过提高逆转录反应温度来提高扩增效果。 设计引物时,避免在引物3’端含有互补序列,避免形成内部发卡结构。 可 …
阅读更多 »提高PCR特异性的策略
1、巣式pcr(Nest-PCR)可增加稀有靶序列的灵敏度;降低了扩增多个靶位点的可能性;提高PCR特异性 2、递减PCR(Touch Down PCR):前几个循环使用严谨的退火条件提高特异性;循环设在比估算的Tm高大约5的退火温度下开始,然后每个循环降低1-2,直到退火温度低于Tm 5 。适合用于AFLP、DNA指纹分析等。 3、热启动PCR:抑制一种基 …
阅读更多 »qPCR试剂对比3
如图所示,engreen的产品在实验中,Ct值更低,无NTC扩增,特异性高,是理想的qPCR试剂。
阅读更多 »