其它

条带弱的原因可能有以下几个方面： ①. 因为蛋白上样量低或目的蛋白在来源组织或细胞中的表达量并不丰富造成。可适当加大蛋白上样量，也可通过提高抗体稀释度或采用灵敏度更高的发光底物来调整，如Enlight-plus。 ②. 蛋白没有充分转移到膜上。转膜后可通过预染Marker判断转膜效率，也可用丽春红染膜、用考马斯亮蓝染胶，判断转膜效率。 ③. 抗体效价不高，用 …

        金属对CCK8显色有影响。当终浓度为1 Mm 的氯化亚铅、氯化铁、硫酸铜会抑制5%、15%、90%的显色反应，使灵敏度降级。如果终浓度是10 Mm 的话，将会100%抑制。 如需了解更多关于cck8产品的信息，请点击https://www.engreen.com.cn/cck-8-kit

       在避光条件下CCK8 试剂在4℃可保存一年。如果需要保存较长时间的话，推荐在-20℃下保存。但是CCK8若反复解冻和冰冻将会增加空白吸收，从而影响检测结果，若经常使用可将试剂存放在4℃冰箱内保存。 如需了解更多关于cck8产品的信息，请点击https://www.engreen.com.cn/cck-8-kit

      RNA转染试剂Entranster-R4000成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调，但未成功转染的细胞却不受影响，这时转染效率和总的细胞数量就很重要，一般细胞数量较少时转染效率高，一些试剂由于本身毒性的影响，太低的细胞数量时毒性明显，所以会要求较高的细胞密度（汇合度），顺便说一句，看一个转染试剂的毒性，看它要求转染时的细胞密度就知道了。 …

      运用体内转染试剂Entranster进行动物体内实验时，实验的重复性或可靠性和整体的实验分不开，如果基础实验（比如细胞实验）充分，而且又有其他的方法进行印证，那么实验的可靠性就很高，这时动物体内转染就不需要太多动物，几十只动物，能说明问题就可以。但如果其他的实验较少，单纯用一种方法进行实验，就需要排除实验过程的客观因素的影响，比如动物本身的差异， …

        不一定要设定。CCK8试剂在参比波长没有吸光度。设定参比波长的目的是为了取出由于样品混浊所带来的吸收。 如需了解更多关于cck8产品的信息，请点击https://www.engreen.com.cn/cck-8-kit

1.        样品质量。所抽取样品的蛋白含量，蛋白变性是否充分等等，还有，蛋白样品的PH值是否在7~8之间。这会直接影响到样品浓缩的效果。此外，蛋白样品是否降解、目的蛋白是否已抽取充分都会对最终结果的可靠性有影响。 2.        凝胶质量。不连续SDS-PAGE胶对凝 …

可能有多种原因：目标蛋白对细胞有毒性，导致细胞死亡；转染试剂以及DNA用量信息需要优化，否则对细胞具有伤害；细胞贴壁转染之后没有正常换液。 建议：考虑对目标蛋白进行截短构建、尝试其他细胞系统；摸索转染试剂以及DNA用量信息，如果转染试剂毒性太大，可以考虑尝试Entranster转染试剂。对转染后的细胞进行换液处理，如果细胞状态感觉不够理想，可以考虑添加一些血 …

我认为，要想做好质粒DNA细胞转染实验，应注意以下几点： 1，  质粒的大小和质量 线性化还是超螺旋会影响转染结果：超螺旋质粒的转染效率比线性DNA高得多，特别是瞬时转染。而线性化DNA转染的整合几率高。质粒太大了转染会困难一些。毕竟，相对致密、较小的外源异物被细胞内吞的几率要大一些。如果你的质粒正好比较大，又没有经验，选择特别注明可以转大质粒的转 …

       有时会有影响。如果药物具有还原性，会和CCK8发生显色反应，增加吸光度。解决办法：首先要确认药物是否有吸收，在含有药物的培养基中加入CCK8，测定450 nm 的吸光度，如果它的吸光度比不含药物的培养基 (加CCK8)的吸光度高，则证明药物有影响，可在加CCK8之前更换培养基，去掉药物的影响。 如需了解更多关于cck8产品的信息，请点击http …