电转染实验时,确定每种细胞类型的最佳细胞密度,以最大限度地提高电穿孔效率。在随后的实验中以这个细胞密度为标准检验实验的重复性。对于大多数悬浮细胞,建议电穿孔时的细胞密度为10×10^6细胞/ml。对于贴壁细胞,建议细胞密度范围为1-5×10^6细胞/ml。 如需了解更多关于电转染试剂的信息,请点击 …
阅读更多 »细胞转染效率重复性差的原因
细胞转染效率重复性差原因: 细胞融合度不同。保证同样的接种量及同样的时间。 细菌污染。可使用Entranster试剂,培养基可加抗生素,避免细胞污染。 细胞传代次数太高了。可重新复苏一管新的细胞。 血清质量不稳定。用同一批号的血清。
阅读更多 »病毒感染细胞效率低怎么办?
病毒感染细胞本来效率就较低,一定要注意以下几点:1.感染时的培养基尽量少些;2. 使用Envirus-LV,可以提高感染效率20-50倍。 病毒感染细胞本来效率就较低,整个过程相对复杂难操作,一般一次花费周期至少两三个月,多则几个月到十几个月不等,经费也是几万到十几万。万一实验失败需要重复操作会花费更多的时间和开支。所以有效提高病毒转染效率是病毒转染细胞的关 …
阅读更多 »western-blot实验影响因素
1. 样品质量。所抽取样品的蛋白含量,蛋白变性是否充分等等,还有,蛋白样品的PH值是否在7~8之间。这会直接影响到样品浓缩的效果。此外,蛋白样品是否降解、目的蛋白是否已抽取充分都会对最终结果的可靠性有影响。 2. 凝胶质量。不连续SDS-PAGE胶对凝胶的 …
阅读更多 »你会正确使用超净台吗?
超净工作台(clean bench)是为了适应现代化工业、光电产业、生物制药以及科研试验等领域对局部工作区域洁净度的需求而设计的。超净工作台原理是在特定的空间内,室内空气经预过滤器初滤,由小型离心风机压入静压箱,再经空气高效过滤器二级过滤,从空气高效过滤器出风面吹出的洁净气流具有一定的和均匀的断面风速,可以排除工作区原来的空气,将尘埃颗粒和生物颗粒带走,以形 …
阅读更多 »如何有效提高细胞转染实验效率?
1.选择合适的转染试剂 不同细胞系转染效率通常不同,但细胞系的选择通常是根据实验的需要,因此在转染实验前应根据实验要求和细胞特性选择适合的转染试剂。每种转染试剂都会提供一些已经成功转染的细胞株列表和文献,通过这些资料可选择最适合实验设计的转染试剂。当然,最适合的是高效、低毒、方便、廉价的转染试剂。如英格恩的 …
阅读更多 »CCK8(engreen)与CD147增加慢性阻塞性肺病患者吸烟引起的粘液分泌研究
CD147在许多组织中表达,并参与许多炎症性疾病。新的证据表明,粘液分泌过多是慢性阻塞性肺病(COPD)的一个恶性因素,导致严重的气道阻塞和反复的气道感染。然而,CD147是否参与慢性阻塞性肺病的粘液生成尚不清楚。现分享一篇CCK8(engreen)与CD147增加慢性阻塞性肺病患者吸烟引起的粘液分泌研究的文献,以供参考。
阅读更多 »细胞转染实验方法有哪些?
1. 脂质体法。中性脂质体是利用脂质膜包裹DNA,借助脂质膜将DNA导入细胞膜内。带正电的阳离子脂质体则不同,DNA并没有预先包埋在脂质体中,而是带负电的DNA自动结合到带正电的脂质体上,形成DNA-阳离子脂质体复合物,从而吸附到带负电的细胞膜表面,经过内吞被导入细胞。脂质体法始于1987年,此法的出现使得转染效率、转染的稳定性和可重复性大大提高。阳离子脂质 …
阅读更多 »细胞转染效率不可重复的原因
细胞相比转染效率不可重复原因: 1.细胞融合度不同。保证同样的接种量及同样的时间。 2.细菌污染。可使用Entranster试剂,培养基可加抗生素,避免细胞污染。 3.细胞传代次数太高了。可重新复苏一管新的细胞。 4.血清质量不稳定。用同一批号的血清。
阅读更多 »细胞转染效率影响因素
转染效率受多种因素影响,主要因素有下面几个: 1.转染试剂 不同细胞系转染效率通常不同,但细胞系的选择通常是根据实验的需要,因此在转染实验前应根据实验要求和细胞特性选择适合的转染试剂。每种转染试剂都会提供一些已经成功转染的细胞株列表和文献,通过这些资料可选择最适合实验设计的转染试剂。当然,最适合的是高效、低 …
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