英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
胃癌是一种常见的上皮性癌，是世界范围内最常见的第五种恶性肿瘤。近年来胃癌的发病率一直呈上升趋势。每年约有一百万例胃癌发生，其中东亚地区占到50%，尤其是中国，严重危害人民健康和生命。中国胃癌的年发病率约为400000，占全世界病例总数的42%，并且总死亡率逐年上升。因此，寻找可靠的胃癌标志物和靶点是至关重要 …
阅读更多 »RNA转染效率低的原因是什么？
RNA转染效率低，可能的原因： · 转染试剂不适合。建议选择RNA专用转染试剂，如Entranster试剂。 · 转染试剂和RNA的量不够，或者比例不对。优化实验条件，调整试剂和RNA用量，优化二者比例。 · 检测时间有问题。适当调整检测时间。 · RNA质量问题。选择纯度高的RNA。 · 细胞状态不佳。调整细胞状态，调整细胞融合度。
阅读更多 »RNA转染（Entranster）与桥本甲状腺炎患者T辅助细胞1型细胞研究
桥本甲状腺炎（Hashimoto’s thyroiditis ，HT），又称慢性淋巴细胞性甲状腺炎，是一种器官特异性自身免疫性疾病，特点是甲状腺实质淋巴细胞浸润，弥漫性甲状腺肿大和自身抗体升高的升高，主要包括抗甲状腺球蛋白抗体（TGAb）和甲状腺过氧化物酶抗体（TPOAb）。HT现在被认为是最常见的自身免疫性疾病，常与其他自身免疫性疾病相关，如Graves病 …
阅读更多 »细胞RNA转染实验的一些建议
1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在，如皮肤，头发，所有徒手接触过 …
阅读更多 »siRNA转染实验需要知道的关键点
1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致siRNA转染实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在，如皮 …
阅读更多 »RNA转染影响因素
转染试剂 转染中要额外注意的就是转染试剂应该是确认无RNase污染的，而且也尽量避免和质粒DNA转染混用——即使试剂本身兼容DNA和RNA转染，因RNA与DNA大小不同，转染条件不同，所需的试剂也应不同，所以RNA专用的转染试剂会更好一些。比如Entranster-R4000. RNA转染时RNA的用量 RNA转染的用量必须参考RNA转染试剂说明，因为RNA …
阅读更多 »RNA细胞转染实验影响因素
转染试剂 转染中要额外注意的就是转染试剂应该是确认无RNase污染的，而且也尽量避免和质粒DNA转染混用——即使试剂本身兼容DNA和RNA转染，因RNA与DNA大小不同，转染条件不同，所需的试剂也应不同，所以RNA专用的转染试剂会更好一些。比如Entranster-R4000. RNA转染时RNA的用量 RNA转染的用量必须参考RNA转染试剂说明，因为RNA …
阅读更多 »RNA转染（Entranster）与人单核细胞来源的树突状细胞的染色质状态调控研究
树突状细胞（DCS）是抗原（Ag）呈递细胞，具有独特的刺激幼T细胞和启动原发性免疫应答的能力。然而，DCs在中枢和外周免疫耐受的诱导和T细胞免疫应答的类型的调节中也具有关键性的作用。依赖于环境，树突状细胞（DCS）可能变得活跃或耐受性，但很少知道是否遗传的表观遗传修饰涉及这些过程。现分享一篇RNA转染（Entranster）与人单核细胞来源的树突状细胞的染色 …
阅读更多 »RNA转染（Entranster）与脊髓损伤后神经细胞凋亡研究
脊髓损伤（SCI）是一种常见的创伤，在损伤组织初始损伤后小时和几天内会有二次细胞变性的发生，会影响到感觉和病变部位运动信号以及神经系统的传导。脊髓损伤后的神经退行性疾病是严重的，其中许多与SCI患者终生残疾有关。现分享一篇RNA转染（Entranster）与脊髓损伤后神经细胞凋亡研究的文献，以供参考。
阅读更多 »siRNA细胞转染效率低下的原因
1. RNA与转染试剂比例不佳 由于RNA序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记，决定了RNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件，建议先进行预实验优化。 2. 细胞密度不佳 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。成功转染siRNA的细胞会产生目标基因表达下调，但未成功转染的细胞却不受影响，这 …
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