1. 制备载体储备液。 2. 以每个靶细胞不同的MOI 或载体剂量转导靶细胞。 腺病毒载体: 100~ 10 000 个病毒颗粒/靶细胞。腺相关病毒载体: 10 000~ 100 000 个病毒基因组/靶细胞。慢病毒载体: MOI5 ~ 500 。 3 在转导后3 ~ 5 天对转入基因的表达进行评价。 对于载体编码蛋白质,有多种方法可用来评价转导细胞中转入基 …
阅读更多 »动物体内转染操作视频(engreen)
质粒DNA转染实验效率影响因素
1, 质粒的构建:启动子的选择 启动子的选择对于转染基因的有效表达是非常重要的。对于转染过程本身虽然无甚影响,但是对转染结果却有着微妙的影响。 2, 质粒的大小和质量 线性化还是超螺旋会影响转染结果:超螺旋质粒的 …
阅读更多 »慢病毒倍比稀释测定活性的实验中,DAY2天时,把稀释好的病毒和细胞孵育过夜时,用把细胞原培养基吸取出去吗,还是直接把病毒液添加进去?
好问题!在进行 慢病毒倍比稀释测定病毒滴度(titer) 的时候,DAY2 加入病毒时是否更换培养基,确实是一个关键点,对感染效率有一定影响。下面是两种常见操作方式,以及推荐做法: 推荐操作:先吸掉培养基,再加病毒(常规做法) 流程简述(以DAY2为节点): DAY1:铺板细胞(如293T、HEK293,常用于测滴度); DAY2:感染操作 吸掉旧培养基; …
阅读更多 »RNA转染与骨形态发生蛋白-2调控PMVECs的肌源性分化研究
肝功能不全和肝硬化影响多种器官系统的脉管系统,导致器官功能受损,导致发病率和死亡率增加。肝肺综合征(HPS)是一种发生在肝硬化晚期的肺微血管疾病,加重原发性肝脏疾病,并引起多种相关并发症。由于HPS在全球范围内受到越来越多的关注,在过去几十年中,HPS的病理研究取得了进展。然而,HPS的病理生理机制尚未确定。 现分享一篇RNA转染(Entranster)与骨 …
阅读更多 »动物体内转染技术可以做什么?
使用动物体内转染专用试剂Entranster-in vivo进行动物体内转染实验可以: ● 代替基因敲除动物,实验从数月缩短到3天,成本从数万减少到几千。 ● 代替转基因动物,动物数量任意,不用担心动物死亡,可任意重复实验。 ● 代替病毒感染动物,效率更高,可以做包括神经系统内到任意器官,全身器官。 ● 可转任意核酸,基因敲除,转基因动物,病毒感染动物无法进 …
阅读更多 »体内转染与前列腺癌向骨转移机制的研究
前列腺癌是美国国内最常见的癌症,也是导致男性癌症相关死亡的第二大原因。高死亡率主要是由于转移到包括骨在内的许多组织。骨是前列腺癌转移最常见的部位,80%以上的患者发生不可治愈的骨转移,前列腺癌向骨转移的机制尚不清楚,前列腺癌细胞和骨骼微环境之间具有复杂的相互作用。骨源性细胞类型通过分泌直接促进前列腺癌进展的因子促进前列腺癌转移。现分享一篇体内转 …
阅读更多 »体内转染(Entranster)与针灸抑制TXNIP相关氧化应激和炎症以减轻血管性痴呆大鼠认知功能障碍研究
氧化应激和炎症与血管性痴呆(VD)的发病机制有关。硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP)在氧化应激和NOD样受体蛋白(NLRP3)炎性体激活中起重要作用。有证据表明针灸在VD中具有抗氧化和神经保护作用。现分享一篇体内转染(Entranster)与针灸抑制TXNIP相关氧化应激和炎症以减轻血管性痴呆大鼠认知功能障碍研究的文献,以供参考。
阅读更多 »RNA转染与mir-155调节胶质瘤细胞增殖和侵袭研究
胶质瘤是成人最常见的原发性恶性脑肿瘤,尽管治疗有所改善,脑胶质瘤患者的预后和生存率仍然非常差。特别是,根据目前WHO脑肿瘤分类,多形性胶质母细胞瘤是最恶性的胶质瘤。探索胶质瘤发生、发展的分子机制,已成为发展胶质瘤新的治疗策略的迫切需求。最近的研究已经报道了脑肿瘤细胞中miRNAs的改变,表明它们在癌基因或抑癌基因中的作用。 现分享一篇RNA转染(Entran …
阅读更多 »RNA转染(Entranster)与雷公藤红素增强肿瘤细胞中缺氧诱导因子-1活性研究
雷公藤红素,是从传统中药雷公藤中提取的一种三萜类化合物,具有抗炎、抑制肿瘤血管生成、抑制肿瘤生长、诱导细胞凋亡以及对人类神经退行性疾病的细胞保护作用等多种作用。然而,这些功能的基础机制并不清楚。现分享一篇RNA转染(Entranster)与雷公藤红素增强肿瘤细胞中缺氧诱导因子-1活性研究的文献,以供参考。
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