1.纯化RNA 在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在,如皮肤,头发,所有徒手接触过 …
阅读更多 »体内转染(entranster)与fbxw5减少可减轻脊髓损伤研究
外伤性脊髓损伤(SCI)是造成死亡和终身残疾的主要原因。然而,对脊髓损伤的病理过程还没有完全了解。F-BOX/WD重复序列包含蛋白5(FBXW5),是scf型E3泛素连接酶复合物的一个亚单位,在调节各种病理方面具有重要作用。然而,对于fbxw5对SCI进展的影响知之甚少。 现分享一篇体内转染(entranster)与fbxw5减少可减轻脊髓损伤 …
阅读更多 »ECL发光液与锌指因子ZNF121和上皮细胞增殖研究
MYC是一种强有力的癌基因蛋白,调节多种细胞过程,包括增殖、凋亡、分化、干细胞特性、衰老和迁移。MYC主要作为转录因子发挥作用,与大量蛋白质相互作用,MYC相互作用蛋白的鉴定和对于理解MYC功能是非常重要的。现分享一篇ECL发光液(enlight)与MYC相互作用蛋白-锌指因子ZNF121和上皮细胞增殖研究 …
阅读更多 »质粒DNA转染实验效率影响因素
1, 质粒的构建:启动子的选择 启动子的选择对于转染基因的有效表达是非常重要的。对于转染过程本身虽然无甚影响,但是对转染结果却有着微妙的影响。 2, 质粒的大小和质量 线性化还是超螺旋会影响转染结果:超螺旋质粒的 …
阅读更多 »为什么选择AAV作为基因治疗的病毒载体?
AAV,即腺相关病毒载体,属于细小病毒科依赖病毒属。野生型AAV感染人宿主细胞后,可以整合到人类19号染色体的AAVS1位点,但AAV不会引起人类疾病。实际上,我们市面常见的AAV并不是野生型AAV,而是重组AAV(rAAV)。 AAV和AAV载体的基因组结构(图片来源:Semantic Scholar) 目前来看,rAAV相比较其他病毒载体,未发现 …
阅读更多 »体内转染(Entranster)与miR-98上调对骨关节炎软骨细胞凋亡抑制作用研究
骨性关节炎(OA)是一种退行性关节疾病,其特征是软骨破坏、关节边缘骨赘形成(骨赘)、软骨下骨硬化、关节囊改变,以及滑膜的炎症等。OA是关节炎最常见的形式,是老年人疼痛和残疾的主要原因,OA对女性的影响比男性大。OA患者最常见的症状是关节疼痛和僵硬,其他症状可能包括关节肿胀、四肢无力和麻木及运动范围减小等。现分享一篇体内转染(Entranster)与 …
阅读更多 »CCK8实验,如何设定空白对照组?
在不含细胞的培养基中加入CCK8,培养一定的时间,测定450 nm的吸光度即为空白对照。在做加药实验(细胞毒性实验)时,还应考虑药物的吸收,可在不含细胞,加入药物的培养基中加定的时间,测定450 nm的吸光度作为空白对照。 如需了解更多关于cck8产品的信息,请点击https://www.engreen.com.cn/cck-8-kit
阅读更多 »动物体内转染后,遗传性状能维持多久?
体内转试剂Entranster转染动物时是属于瞬时的转染,对目标基因的改变,一般注射1次,可以维持7天左右。随后,随着转入的核酸的代谢,效应减弱消失。动物是否回复到原有的生理状态,这与目标基因有关系。如果希望长期维持动物的转染状态,可多次注射。
阅读更多 »体内转染(entranster)与食管癌细胞的增殖、迁移和侵袭研究
中国是食管癌(esophageal cancer,EC)高发地区,平均每年有约375000人死于食管癌。手术、放疗和化疗是治疗EC的主要方法。然而,晚期和转移性ECS的总生存率仍然很低,晚期肿瘤的5年生存率低于20%。由于治疗技术的局限性,迫切需要探索一种新的有效的EC治疗方法。之前的研究表明,MIR-203-3P,通过下调RAN和MIR-21 …
阅读更多 »体内转染(Entranster)与高迁移率族B1在大鼠冠状动脉微栓塞致心肌损伤中的作用研究
冠状动脉微栓塞(CME)是急性心肌梗死(AMI)急诊经皮冠状动脉介入治疗的常见并发症,发生率为15%~20%。它可以直接导致“无血流”或“血流缓慢”。它是AMI患者长期预后不良和主要心脏不良事件的独立预测因子。研究表明,CME引起的局部心肌炎症是导致进行性心功能不全的主要原因。现分享一篇体内转染(Entranster)与高迁移率族B1在大鼠冠状动脉微栓塞致心 …
阅读更多 »