英格恩生物技术博客 生物实验干货分享
去分化软骨肉瘤（DDCs）是一种特殊类型的肉瘤，约占传统软骨肉瘤（CCS）的10%～15%。DDCs是一种由两种不同成分组成的肿瘤，一种与低级别CCS相邻的恶性肿瘤，两部分之间有清晰的边界。由于早期转移而对化疗缺乏反应，DDCS预后差，5年生存率仅为10%～24%。因此，迫切需要探索 …
阅读更多 »siRNA转染实验的关键点
1.纯化siRNA siRNA的浓度和纯度对转染实验非常重要。为得到高纯度的siRNA，推荐用玻璃纤维结合，洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸，小的寡核苷酸，蛋白和盐离子。注意：化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化（即PAGE胶纯化）。 2.避免RNA酶污染 微量的RNA酶将导致siRNA转染实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在，如皮 …
阅读更多 »体内转染siRNA敲降TREM2与神经炎症和认知障碍研究
作为衰老过程中的主要特征，神经性炎症参与几种与衰老相关疾病的发病机制，包括阿尔茨海默氏病（AD）。触发受体表达髓系细胞（TREM）2是一种新的AD致病基因，但是关于TREM2在与衰老相关的神经炎症、认知障碍等方便研究不足。现分享一篇运用体内转染siRNA（Entranster-in vivo）敲降TREM2的 …
阅读更多 »ECL发光液（enlight）与羟基氯喹和自噬体及宫颈癌SiHa细胞研究
羟基氯喹（Hydroxychloroquine，HCQ），氯喹的羟基化类似物，是一种抗疟原虫溶酶体抑制剂，它抑制溶酶体酸化引起的自噬，并随后阻断自噬体与溶酶体的融合，从而导致自噬体的积累，从而加速肿瘤细胞的死亡。现分享一篇ECL发光液（enlight）与羟基氯喹和自噬体及宫颈癌SiHa细胞研究的文献，以供参考。
阅读更多 »电转染实验时，siRNA有什么要求？
使用Entranster-E试剂进行电转染实验时，要求使用纯度高、无菌且序列正确的siRNA。确定电转染的最佳siRNA浓度。尝试在250-750nM最终浓度范围内的siRNA浓度。Engreen建议导入一个非靶向或无意义的siRNA控制序列，以验证siRNA的基因特异性。此外，针对具有多个siRNA序列的基因可确保产生的表型不是由于脱靶效应所致 …
阅读更多 »体内转染（Entranster）与膜联蛋白A7和大鼠继发性脑损伤研究
谷氨酸兴奋性中毒参与了脑出血（ICH）引起的继发性脑损伤（SBI）。突触体相关蛋白23（SNAP23）和SNAP25分别参与突触前谷氨酸的释放和突触后谷氨酸受体（NMDA受体）运输，这两者对于谷氨酸介导的兴奋性毒性都是必不可少的。SNAP23和SNAP25具有较高的同源性，SNAP23被证明可与膜联蛋白A7（ANXA7）相互作用。现分享一篇体内 …
阅读更多 »The British Pharmacological Society | 同济大学医学院郭传勇教授团队报道：非酒精脂肪肝新疗法
郭传勇教授团队在《The British Pharmacological Society》期刊发表了题为“Astaxanthin attenuates hepatic damage and mitochondrial dysfunction in non-alcoholic fatty liver disease by upregulating …
阅读更多 »siRNA转染与成纤维细胞瘤细胞l929-a研究
L929成纤维细胞瘤细胞（l929-a）和L929纤维肉瘤细胞（l929-n）是不同的细胞系，常用于肿瘤坏死的细胞毒性因子α（TNFα）的研究，TNFa已被报道可诱导两种细胞系的坏死。然而，当比较TNFα诱导的在这两个细胞系的细胞死亡时，l929-n表现出典型的RIP3依赖性细胞坏死，在l929-a中却不是 …
阅读更多 »体内转染siRNA（Entranster）与神经炎症和认知障碍研究
作为衰老过程中的主要特征，神经性炎症参与几种与衰老相关疾病的发病机制，包括阿尔茨海默氏病（AD）。触发受体表达髓系细胞（TREM）2是一种新的AD致病基因，但是关于TREM2在与衰老相关的神经炎症、认知障碍等方便研究不足。现分享一篇运用体内转染siRNA（Entranster-in vivo）敲降TREM2的方法与神经炎症和认知障碍研究的文献，文献 …
阅读更多 »慢病毒载体构建原理
慢病毒载体的包装系统一般由两部分组成，即包装成分和载体成分。包装成分由HIV-1基因组去除了包装、逆转录和整合所需的顺式作用序列而构建，能够反式提供产生病毒颗粒所必需的蛋白；载体成分则与包装成分互补，即含有包装、逆转录和整合所需的顺式作用序列，同时具有异源启动子控制下的多克隆位点及在此位点插入的目的基因。将包装成分与载体成分的多个质粒共转染包装 …
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